【名稱】：人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒

【規(guī)格】：48T/96T
【方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】： 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
【標(biāo)本】血清,、血漿,、細胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等
【用途】：科研 實驗
【貯存】： 貯存于2℃-8℃.如有需要,，我們將竭城為顧客提供售前，售中,，售后的*服務(wù)!
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存
1）.細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
2）細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,，或者細胞超聲粉碎,，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下,，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘，取上清待測,。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進行檢測,。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
7）保存：如果樣品不能立即檢測,，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒操作步驟
1）取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置30分鐘,。
2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6個濃度）、空白孔,、待測樣品組,。
3）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備小試管6 只，依次編好號碼,，先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,，然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻,；然后在該試管中取100ul,，棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品,。
注：為減少實驗誤差,，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔,。
4）加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去,，如此重復(fù)5 次，拍干,。
7）加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
8）溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時,。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s,，充分清洗酶標(biāo)板5次,，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后,，再加入顯色劑B液50ul,。
11）終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液,。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值,。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)，以免影響準(zhǔn)確性,。
酶聯(lián)免疫試驗競爭法
競爭法可用于測定抗原,，也可用于測定抗體。以測定抗原為例,，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,，因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下：
（1）將特異抗體與固相載體連接,，形成固相抗體,。洗滌。
（2）待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理的混合溶液,，使之與固相抗體反應(yīng),。如受檢標(biāo)本中無抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合,。如受檢標(biāo)本中含有抗原,，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合，競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機會,，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少,。參考管中只加酶標(biāo)抗原，保溫后,，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達zui充分的量,。洗滌。
（3）加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,，故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本抗原的量,。待測管顏色越淡,，表示標(biāo)本中抗原含量越多。
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒注意事項
1）實驗操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染,。
2）加樣：加樣時，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3）孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4）反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5）建議實驗前預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進行稀釋,，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋數(shù),。
6）建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本）,，如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商，如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒退換貨政策
若發(fā)生退換貨需求,，請先致電客服人員,。符合退換貨政策的，我司將與您簽訂退換貨協(xié)議,，并根據(jù)協(xié)議進行退換貨,。
特別說明，以下情況不予辦理退換貨：
1,、客戶在訂購產(chǎn)品時請仔細確認后再行訂購,，由客戶選型失誤而造成的退貨需求，我方不承擔(dān)任何責(zé)任,。產(chǎn)品大多性質(zhì)較為特殊,，存儲方式復(fù)雜，請用戶按照貯存條件說明妥善保存,。
2,、已超過受理期限的產(chǎn)品；
3,、產(chǎn)品無標(biāo)簽,，或標(biāo)簽已無法識別是否屬于我司試劑的產(chǎn)品；
4,、密封產(chǎn)品原包裝打開,，一次性封貼或膠條破損（質(zhì)量問題除外）,；
5,、產(chǎn)品已使用（質(zhì)量問題除外）；
6,、由于您的操作原因,、使用環(huán)境限成的誤報以及實際情況與您描述不符，我司將不予受理申請退貨,；
7,、涉及產(chǎn)品退回,，客戶需要與我們客服人員并按照相關(guān)指導(dǎo)操作運輸事宜。