【名稱】：人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒

【規(guī)格】：48T/96T
【方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】： 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物,。
【標本】血清、血漿,、細胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等
【用途】：科研 實驗
【貯存】： 貯存于2℃-8℃.如有需要，我們將竭城為顧客提供售前,，售中,，售后的*服務!
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1）.細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次,，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融,，使細胞破壞并放出細胞內成份,，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測,。
4）血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
5）體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測,。
樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測,，應將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘,。
2）分組：取出96孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設標準品組（6個濃度）,、空白孔、待測樣品組。
3）標準品的稀釋：準備小試管6 只,，依次編好號碼,，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第五只試管中,，充分混勻；然后在該試管中取100ul,，棄掉,。第六只試管作為0 號標準品。
注：為減少實驗誤差,，保證準確性,，建議設置復孔。
4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入50ul的蒸餾水,；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
6）洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒棄去，如此重復5 次,，拍干,。
7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）,。
8）溫育：酶標板用封板紙密封后,，放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置15-30s,，充分清洗酶標板5次,，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后,，再加入顯色劑B液50ul,。
11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘,，加入50ul終止液,。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內,，以免影響準確性。
酶聯(lián)免疫試驗競爭法
競爭法可用于測定抗原,，也可用于測定抗體,。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,，因此結合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下：
（1）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體,。洗滌,。
（2）待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原醫(yī)學教丨育網(wǎng)整理的混合溶液，使之與固相抗體反應,。如受檢標本中無抗原,，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原,，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,，競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少,。參考管中只加酶標抗原,，保溫后，酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量,。洗滌,。
（3）加底物顯色：參考管中由于結合的酶標抗原zui多，故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,，表示標本中抗原含量越多,。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒注意事項
1）實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染,。
2）加樣：加樣時,，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間,，從而影響實驗的準確性以及重復性,。
3）孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4）反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5）建議實驗前預測樣品含量,，如樣品濃度過高,，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋數(shù),。
6）建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線,，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商,，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換,，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒退換貨政策
若發(fā)生退換貨需求，請先致電客服人員,。符合退換貨政策的,，我司將與您簽訂退換貨協(xié)議，并根據(jù)協(xié)議進行退換貨,。
特別說明,，以下情況不予辦理退換貨：
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2,、已超過受理期限的產(chǎn)品,；
3、產(chǎn)品無標簽,，或標簽已無法識別是否屬于我司試劑的產(chǎn)品,；
4、密封產(chǎn)品原包裝打開,，一次性封貼或膠條破損（質量問題除外）,；
5,、產(chǎn)品已使用（質量問題除外）；
6,、由于您的操作原因,、使用環(huán)境限成的誤報以及實際情況與您描述不符，我司將不予受理申請退貨,；
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