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讓我司歐陽老師給各位說說ELISA試劑盒的理論跟實踐關系
閱讀:689 發(fā)布時間:2015-12-24目前國內(nèi)科研及生物行業(yè)的人,,沒有人不了解ELISA試劑盒,,但是對于剛?cè)雽W的新人員來說,還是有很多不解的地方,,一個實驗在正式開展之前,,首先要了解的是理論知識。而理論與實踐都是*的,,今日我司歐陽老師給您說說理論與實踐的關系,。
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫并且干燥的條件下,一般可以保存6個月,,而有些不完整的試劑盒,,僅供應包被用抗原或抗體,,檢測人員需自行包被。固相載體和包被過程:
在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,,不參與化學反應??勺鱁LISA試劑盒中載體的材料很多,,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能,,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,,加之它的價格低廉,所以被普遍采用,。聚苯乙烯為塑料,,可制成各種形式。
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,,即加標本和加酶結(jié)合物后,。ELISA試劑盒抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,,有人稱之為孵育,,在ELISA中似不恰當。
加入板孔中的標本,,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,,因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點,。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育,。
從理論來說,,溫育采用的溫度有43℃、37℃,、室溫和4℃(冰箱溫度)等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度,。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時,,產(chǎn)物的可達,。
這些理論知識跟實踐大家都了解了嗎?還有不明白的,,下期我們還在這不見不散哦,!