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初夏談?wù)fELISA抽吸的操作技巧
閱讀：817 發(fā)布時(shí)間：2015-5-12時(shí)值五月初夏，再次一次迎來(lái)了ELISA科研高峰期,，歡迎各位朋友們資訊采購(gòu)我司試劑盒產(chǎn)品，提供全程技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)及代測(cè),，為您的實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助及節(jié)省時(shí)間,。上海滬鼎生物公司每周都有技術(shù)分享給大家，有需要了解的可以關(guān)注收藏我公司商鋪地址,。
在ELISA實(shí)驗(yàn)中,，洗滌是關(guān)鍵步驟之一。而有一些參數(shù)會(huì)影響洗滌步驟的效果，這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,，這兩者都能調(diào)整,，以降低背景(殘留量)和差異。下面我們就一起來(lái)看看今天的重點(diǎn)內(nèi)容,，上海滬鼎與您初夏談?wù)fELISA抽吸的操作技巧,。
殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體，它們會(huì)增加背景信號(hào),。殘留量越小,，殘留液體越少，轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少,。吸液高度會(huì)明顯影響殘留量,；如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大，那就會(huì)讓殘留量急劇增加,。反之,，如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部，那么也會(huì)使吸液效率降低,，殘留量增加,。
目前的洗板機(jī)一般使用兩種類(lèi)型的洗頭：剛性和浮動(dòng)的。浮動(dòng)洗頭中的吸頭可在洗滌過(guò)程中自由上下移動(dòng),，而剛性洗頭則固定在適當(dāng)?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來(lái)更為復(fù)雜，因?yàn)槟阈枰浅Ｗ屑?xì)地調(diào)整吸液高度,。如果你們實(shí)驗(yàn)室使用幾種不同的板,，那可能會(huì)很耗時(shí)。在使用浮動(dòng)洗頭時(shí),，吸頭會(huì)降到反應(yīng)孔的底部,。調(diào)整高度就不是很重要，因此洗頭會(huì)下降到底部,。
抽吸的位置也對(duì)殘留量有著重要影響,；如果每個(gè)孔只使用一個(gè)抽吸點(diǎn)(這很常見(jiàn)，因?yàn)楦?,，那么抽吸的位置需要優(yōu)化,。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應(yīng)孔的中間,，即使這是所有洗頭zui常見(jiàn)的默認(rèn)位置,。一般來(lái)說(shuō)，*位置在孔中間與孔壁之間的某處,。
反應(yīng)孔的形狀也會(huì)影響殘留量,。C形底(平底圓角)的微孔板一般會(huì)比那些平底尖角的微孔板殘留量更低,。
如果沒(méi)有自動(dòng)洗板機(jī)，采用手工洗滌,，那么也需要注意幾點(diǎn),。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法進(jìn)行洗滌,；不同廠家的洗液不宜相互混用,。洗板時(shí)需保證微孔板平放，將洗滌液注滿(mǎn)各孔,，但盡量避免漏液溢液,，以每孔300 μl為宜；板洗次數(shù)一般為3次,，要保證洗板的浸泡時(shí)間,，每次浸泡時(shí)間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量,，推薦每次洗板后進(jìn)行拍板,，并及時(shí)更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應(yīng)孔內(nèi),。
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