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用表格形式表達(dá)elisa競(jìng)爭(zhēng)法操作
閱讀:1021 發(fā)布時(shí)間:2014-8-27 每個(gè)試劑盒都包括5-6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、48或96孔抗體包被微孔,、48或96孔顏色標(biāo)記的稀釋孔,、酶聯(lián)偶合物、底物和終止液等,。今天上海滬鼎為您用表格的形式來(lái)表達(dá)elisa競(jìng)爭(zhēng)法的操作,,將陰性標(biāo)本94份并用生理鹽水進(jìn)行1:30稀釋?zhuān)诩尤霕?biāo)本后按下表時(shí)間放置后再加入酶標(biāo)抗體,然后檢測(cè)結(jié)果如下:
從上表可以看出,,假猶如時(shí)加入標(biāo)本與酶標(biāo)抗體,,沒(méi)泛起假陽(yáng)性現(xiàn)象。特別是在放置時(shí)間長(zhǎng),,且溫度高的情況下,,對(duì)結(jié)果有很大的影響,。第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海病院對(duì)此造成的影響進(jìn)行了研究。因此建議競(jìng)爭(zhēng)按捺法的項(xiàng)目,,加十個(gè)樣本后立刻加酶標(biāo)抗體,,這樣對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有影響。但實(shí)際工作中并非如斯,,都是分開(kāi)加入反應(yīng)孔,。2分鐘后再加入酶標(biāo)抗體,因?yàn)闃?biāo)本比酶標(biāo)抗體先結(jié)合了兩分鐘,,因此泛起了7.4%的假陽(yáng)性,。而競(jìng)爭(zhēng)按捺法的原理:酶標(biāo)抗體與樣本抗體在同樣的體系中,與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合是等比關(guān)系,。30分鐘后再加,,假陽(yáng)性高達(dá)57.4%。這樣會(huì)造成先加入的先結(jié)合,,與后加入者并不是公平的關(guān)系,,因而也不符合等比原則。原論上講,,應(yīng)該先將樣本與酶標(biāo)抗體先行混勻,,然后加入反應(yīng)也進(jìn)行。兩對(duì)半使用ELISA方法,,其中HBsAg,、HBsAb、HBeAg使用雙抗原/抗體夾心法檢測(cè),,而HBcAb,、HBeAb使用競(jìng)爭(zhēng)按捺法檢測(cè)。
上海滬鼎試劑盒優(yōu)勢(shì)占據(jù):,、結(jié)果與HPLC方法一致,、高靈敏度、重現(xiàn)性好,、在同一實(shí)驗(yàn)室或不同實(shí)驗(yàn)室之間保證結(jié)果的穩(wěn)定性,。