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    對(duì)elisa實(shí)驗(yàn)有了解的朋友們知道,，它可以用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體,。在這種測(cè)定方法中有三種（固相的抗原或抗體,、酶標(biāo)記的抗原或抗體、酶作用的底物）必要的試劑,，我們根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
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 在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí)，如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,，則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步,。這種雙位點(diǎn)一步不但簡化了操作，縮短了反應(yīng)時(shí)間,，如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體,，測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平,。
在一步法測(cè)定中,，應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)，類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí),，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,，而不再形成夾心復(fù)合物，所得結(jié)果將低于實(shí)際含量,。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果,。
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