化工儀器網(wǎng)
資料下載
小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒操作手冊
閱讀：637 發(fā)布時間：2015-4-7| 提 供 商 | 上海滬鼎生物科技有限公司 | 資料大小 | 183KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 196次 | |
| 資料類型 | PDF 文件 | 瀏覽次數(shù) | 637次 |
| 免費下載 | 點擊下載 |
小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒操作手冊--上海滬鼎生物
一,、實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)水平,。用純化的小鼠血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)，再與HRP 標記的血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標準曲線計算樣品中小鼠血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)濃度,。
二、標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
標本收集：
1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,，無內(nèi)毒素試管。
2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA,。避免使用溶血,，高血脂標本。
3.標本應(yīng)清澈透明,，懸浮物應(yīng)離心去除,。
4.標本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝,，凍存于-20℃,，-70℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融,，3-6月內(nèi)檢測,。
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,，及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。標本?yīng)避免反復(fù)凍融,。
三、“小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒"操作示意圖
操作指南：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果
四,、注意事項
1.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,，做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
產(chǎn)品說明：本試劑盒僅供研究使用,。