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大鼠ELISA試劑盒（腫瘤壞死因子）中文說明書
閱讀：648 發(fā)布時間：2014-10-11| 提 供 商 | 上海滬鼎生物科技有限公司 | 資料大小 | 83.2KB |
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| 資料類型 | PNG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 648次 |
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大鼠ELISA試劑盒(腫瘤壞死因子)中文說明書
·本試劑僅供研究使用
·試驗原理：
IFN-Y試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IFN-Y濃度的標(biāo)準品,、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將IFN-Y和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A、B,，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IFN-Y的濃度呈比例關(guān)系,。_________________________________________________________________________________
·自備材料：
1.蒸餾水,。
2.加樣器：5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等,。
·樣品收集,、處理及保存方法：
1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿：EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液,。
5.保存：如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
·安全性：
1.避免直接接觸終止液和底物A,、B,，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。
2.實難中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
·試劑盒性能：
1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2.特異性：不與其它細胞因子反應(yīng),。
3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。
·結(jié)果判斷與分析：
1.儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線,，樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準曲線換算出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準物的濃度與OD值計算出標(biāo)準曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度,。
3.檢測值范圍：0-400pg/ml
4.敏感度：1.0pg/ml