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上海滬鼎全面解析重復(fù)性差的原因
閱讀:1258 發(fā)布時間:2015-11-3在elisa實驗中新手朋友由于各種的原因重復(fù)性會差,,上海滬鼎的錢為您詳細(xì)整理了重復(fù)性差的9大因素:
1,、樣品數(shù)量不一,,加樣時間長短不一 | 重復(fù)某一樣品時,,加樣時間盡可能與*次接近 |
2、樣品加入后未混勻 | 加樣后在混勻器上充分混勻 |
3,、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對 | TMB顯色用450/630波長 |
4,、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差 | 校對酶標(biāo)儀 |
5、洗滌不正確 | 洗滌液注滿各孔但不要溢出,。洗板時反應(yīng)板面向下,,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈,、無或少塵的吸水材料上拍干,。洗板機洗板時不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分 |
6,、溫育條件不一致(一次用水育,,一次用恒溫箱) | 恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃ |
7,、不慎多加或少加酶或顯色劑 | 多加時顯色深,,少加則淺,用記號筆圈上,,便于分析 |
8,、閾值附近時陰時陽 | 同一樣品做三個復(fù)孔,以二個(含二個以上相同結(jié)果為準(zhǔn)) |
9,、加樣量不足,、保溫時間、洗滌條件一致 | 盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復(fù)測定標(biāo)本,。條件,、人員等應(yīng)盡量與上次保持一致 |
希望經(jīng)過以上的分析能使您避開這些問題,能成功的做出的實驗,!