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至今為止,，抗原修復(fù)有許多種方法，在這些方法中,，有的是根據(jù)抗體的要求來(lái)進(jìn)行,，有的是根據(jù)抗原的表達(dá)程度來(lái)進(jìn)行,，我們則對(duì)每種病例每項(xiàng)檢測(cè)，都要求必須進(jìn)行抗原修復(fù),，以達(dá)到抗原全面表達(dá)的*狀態(tài),。
1.  真空負(fù)壓抗原修復(fù)法：
① 切片脫蠟至水。
②0.3%H2O2甲醇真空負(fù)壓處理5分鐘,。
③自來(lái)水洗,，蒸餾水洗,。
④0.01M檸檬酸鹽緩沖液(PH6.0),，真空負(fù)壓干燥箱預(yù)先調(diào)至95 ℃，真空負(fù)壓處理10分鐘,。
⑤待修復(fù)注降至室溫的一,，PBS洗3次，隨后按選好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色,。
2.  微波輻射抗原修復(fù)法：
①切片脫蠟至水,。
②0.3%H2O2甲醇處理10分鐘,。
③自來(lái)水洗,，蒸餾水洗。
④ 0.01 M檸檬酸鹽緩沖液(PH6.0),，于微波爐內(nèi)微波輻射10分鐘,，如檢測(cè)Er和Pr則需要20輻射分鐘左右,。
⑤待修復(fù)液降至室溫后,，PBS洗3次，隨后按選好的免疫組織化學(xué)的染色方法進(jìn)行染色,。
3.  高壓抗原修復(fù)法：
①切片脫蠟至水。
②0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘,。
③自來(lái)水洗,，蒸餾水洗,。
④切片放入抗原修復(fù)液中,，邊同容器放入高壓鍋中加熱至沸騰。蓋上壓力閥至噴汽后持續(xù)1-4分鐘,。
⑤待修復(fù)液恢復(fù)至室溫后,，PBS洗3次,，隨后按選好的免疫組織化學(xué)染色方法進(jìn)行染色,。
4.  隔水熱抗原修復(fù)法：
①切片脫蠟至水,。
②0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘。
③自來(lái)水洗,，蒸餾水洗,。
④切片放入0.01 M檸檬酸鹽緩沖液(PH0.6)中，邊同容器一起放入水溶鍋中加熱,，其間應(yīng)不斷用溫度計(jì)測(cè)其溫度,，待抗原修復(fù)液的溫度達(dá)到有效溫度后(92 ℃)。即開(kāi)始計(jì)時(shí),，持續(xù)40分鐘,。
⑤待抗原修復(fù)液恢復(fù)至室溫后，PBS洗3次,，隨后按選定好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色,。
5.  電爐加熱抗原修復(fù)法：
①切片脫蠟至水。
②0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘,。
③自來(lái)水洗,，蒸餾水洗。
④ 將切片放入抗原修復(fù)液中于電爐上加熱,，不時(shí)用溫度計(jì)測(cè)量溫度,，當(dāng)達(dá)92 ℃后，即可拔離電源,，當(dāng)溫度低于92℃時(shí)，再插上電源,，如此反復(fù)持續(xù)至10分鐘左右。
⑤待抗原修復(fù)液降至室溫后,，PBS洗3次,，隨后按選定的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。