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新學期ELISA曲線問題解析
閱讀：1288 發(fā)布時間：2015-3-19日前，我公司錢在售后問題處理過程中,，接到了遵義醫(yī)學院許老師的實驗,，在問題描述中，許老師問道：“我做的ELISA沒有試劑盒,，都是自己包板封閉孵育,。做了很長時間，標準曲線的梯度都不好,。剛加完顯色劑的時候梯度還算明顯,，但是顯色比較淺，隨著時間延長(大概6,、7分鐘)以后梯度就不明顯了,。終止反應后測得的值梯度就沒有了。"請問這是怎么回事？
關于許老師的疑問,，錢為之安排的技術員解析道：
①樣本中有能夠催化底物的物質,，沒洗下來。
②包被,、酶標重新做梯度,，先用較低的濃度把梯度摸索好，然后再優(yōu)化靈敏度,，zui后調出所需的靈敏度,、線性范圍。
③是不是酶濃度太高,，導致zui后顯色結果都是高的,？
④包被-酶標系統(tǒng)不匹配或者酶標的非特異反應太強，或者酶標儀讀數范圍不夠,，或者干脆酶標儀壞了,。
⑤有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學發(fā)光上,，加完底物三分鐘讀數,，這樣可能比較適合你。
⑥酶是自己標的么,，見過有人把酶給標壞了出現這種情況的,，HRP的話，比例不要太高,，酶掛的太多了也不好的,。
⑦剛加完顯色劑時梯度明顯：顯色液是不是從高濃度向低濃度孔加的啊。
⑧蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,，顯色十分鐘就差不多了。
看到我公司的問題分析內容后,，許老師再贊上海滬鼎的服務效率好,。以上內容就是錢今天給大家?guī)淼男聦W期ELISA曲線問題解析，了解更多,。