化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
實驗分析標(biāo)準(zhǔn)品制備方法及鑒定技術(shù)
閱讀：2602 發(fā)布時間：2013-7-1實驗分析標(biāo)準(zhǔn)品制備方法及鑒定技術(shù)
零值血清的制備方法有：
（1）吸附法：血清中小分子物質(zhì)如三碘甲狀腺原氨酸（T3）,、甲狀腺素（T4）等,，可用活性炭吸附去除,。這種方法簡便,，但待測物質(zhì)難以清除干凈,，而且大分子活性物質(zhì)不能用此法進行制備,。
（2）反復(fù)凍融法：對大分子活性物質(zhì)可選用低值血清，經(jīng)反復(fù)凍融使被測物質(zhì)失活,。用這種方法可使某些蛋白類激素大部分失活,，但也難以得到真正的零值血清。
（3）親和層析法：用特異性抗體制備親和層析柱，用以吸附被測抗原,。用這種方法可以得到高質(zhì)量的零值血清,，但本法比較復(fù)雜而且成本也高。
2）標(biāo)準(zhǔn)物純品的選擇：應(yīng)選擇高化學(xué)純和高免疫純的純品作標(biāo)準(zhǔn)品,。其中免疫純尤為重要,，在標(biāo)準(zhǔn)品中不應(yīng)含有與被測物質(zhì)有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。
3）標(biāo)準(zhǔn)品的制備：先用零值血清配置高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,，然后根據(jù)實驗系統(tǒng)的要求,，用零值血清將高值血清稀釋至應(yīng)有的濃度，制成符合預(yù)定要求的,，由不同濃度組成的系列標(biāo)準(zhǔn)品,。
2．標(biāo)準(zhǔn)品的鑒定
1）免疫活性的鑒定：選用高特異性的抗血清分別作*標(biāo)準(zhǔn)品（如WHO的參考品或國家標(biāo)準(zhǔn)品）的待鑒定標(biāo)準(zhǔn)品的劑量反應(yīng)曲線，并觀察兩條曲線的平行性,。如兩條劑量反應(yīng)曲線平行,，說明兩種物質(zhì)對同一抗體有相同的親和力，即二者是同質(zhì)性物質(zhì),。如兩條劑量反應(yīng)曲線不平行,，說明兩種物質(zhì)具有異質(zhì)性，因而這一待鑒定的標(biāo)準(zhǔn)品是不能使用的,。
2）濃度的標(biāo)定：用已鑒定過的,，免疫活性合格的標(biāo)準(zhǔn)品，與*的標(biāo)準(zhǔn)品作濃度相同的劑量反應(yīng)曲線,。此時,，兩條劑量反應(yīng)曲線應(yīng)該是基本重合的。如果兩者平行但不重合,，則取兩條劑量反應(yīng)曲線的50%結(jié)合處的相應(yīng)劑量（ ED50 ）計算二者的換算系數(shù),，然后調(diào)整待鑒定標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，直至使兩條劑量反應(yīng)曲線*或基本重合為止,。
3．標(biāo)準(zhǔn)品的計量：許多小分子抗原或半抗原已能得到純品或進行合成,，它們對作為標(biāo)準(zhǔn)品的要求可以得到基本的滿足，其計量多直接用單位體積中的重量表示,，如mg / ml,、ng / ml 、pg / ml等,。zui近WHO推薦用質(zhì)量單位取代重量單位,，即mol / L、mmol / L,、或nmol / L等,。對大分子的活性物質(zhì)則比較復(fù)雜,。由于得不到的純品，故很難直接用單位體積中的重量或單位體積中的質(zhì)量計量,。因此,，常用該物質(zhì)的生物活性單位表示，如IU / L,、mIU / L等,。
1．標(biāo)準(zhǔn)品的制備：標(biāo)準(zhǔn)品的制備是非常復(fù)雜的問題，也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個成分,。以下討論的是實驗室標(biāo)準(zhǔn)品（或商品化試劑中標(biāo)準(zhǔn)品）的制備。
1）基質(zhì)的制備：如前所述,，作為標(biāo)準(zhǔn)品的介質(zhì)（基質(zhì)）成分應(yīng)與被測樣品相同,。對大多數(shù)用于測定血清中某物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)用不含被測物質(zhì)的零血清制備,，以求反應(yīng)的介質(zhì)環(huán)境相當(dāng),。但有時零值血清的制備十分困難，所以有些標(biāo)準(zhǔn)品用適當(dāng)?shù)木彌_液制備,，并在緩沖液中加入一定量的載體蛋白（一般用1%～2%的牛血清白蛋白）,，以便使其與樣品的介質(zhì)環(huán)境相近。
上海滬鼎代理美國Amresco公司——3000種植物化學(xué)/中草藥對照品和試劑盒,，具體產(chǎn)品類別包擴：環(huán)境污染類標(biāo)準(zhǔn)品,，廢水類標(biāo)準(zhǔn)品，固體廢棄物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,，殺蟲劑標(biāo)準(zhǔn)品,，藥物標(biāo)準(zhǔn)品，藥物雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,，乙醇標(biāo)準(zhǔn)品,，無機物標(biāo)準(zhǔn)品，（ICP及金屬）EPA方法相關(guān)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)品,。咨詢標(biāo)準(zhǔn)品價格,，生化試劑。