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操作因素可致elisa結(jié)果差異
閱讀:2298 發(fā)布時間:2013-3-13操作因素可致elisa結(jié)果差異
一,、操作因素對ELISA結(jié)果的影響
ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差,。以下敘述各個步驟中的影響因素,。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果,,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),,這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù),。
三、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測過程復(fù)雜,,影響因素較多,,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,,比如對HBsAg、HBeAg,、HCV-Ab,、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑,、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進行復(fù)查,。
四,、結(jié)果判斷
常用下列幾種方法表示結(jié)果:
1.定性測定
2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示,。
3.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進行ELISA測定,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,結(jié)果以量或單位表示,。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,,并保證保存條件,。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性,;對于效期短,、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,,每次使用則取分裝部分即可,,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,,前者包括類風(fēng)濕因子,、補體、異嗜性抗體,、自身抗體,、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細菌污染,、標(biāo)本貯存時間過長、標(biāo)本凝固不全,、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等,。
本公司提供各種種屬各種系列ELISA檢測試劑盒,主要用于科研方面,,不用于臨床診斷,。可以用于檢測各種指標(biāo)。
主要分為以下系列:
1.細胞因子檢測試劑盒
2.內(nèi)分泌檢測試劑盒
3.肝纖維化檢測試劑盒
4.心肌梗塞檢測試劑盒
5.腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒
6.自身免疫檢測試劑盒
7.優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒
8.傳染病檢測試劑盒等等,。
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