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ELISA試劑盒為何“罷工“?六大變質(zhì)原因深度剖析
閱讀:44 發(fā)布時(shí)間:2025-5-27一、方法學(xué)缺陷:競(jìng)爭(zhēng)抑制法成重災(zāi)區(qū)
操作時(shí)差效應(yīng):競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb/HBcAb檢測(cè)常用)易因加樣時(shí)間差異導(dǎo)致不-公平競(jìng)爭(zhēng),,重復(fù)性差
質(zhì)量控制難點(diǎn):相較于雙抗體夾心法等,該模式對(duì)溫育時(shí)間敏感度更高
二,、試劑因素:批間差異與保存條件
生產(chǎn)波動(dòng):不同批次間活性成分濃度存在天然差異,,建議選擇長(zhǎng)批號(hào)試劑
儲(chǔ)存不當(dāng):2-8℃避光保存為基本要求,反復(fù)凍融會(huì)破壞酶標(biāo)記物活性(尤其HRP標(biāo)記抗體)
分裝技巧:使用率低的試劑應(yīng)分裝保存,,避免整盒反復(fù)凍融
三,、樣本污染:隱形殺手清單
干擾類型具體表現(xiàn)內(nèi)源性類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、異嗜性抗體等造成假陽(yáng)性外源性溶血、細(xì)菌污染,、反復(fù)凍融標(biāo)本導(dǎo)致蛋白降解
四,、操作失誤:細(xì)節(jié)決定成敗
加樣誤差:未更換吸頭導(dǎo)致交叉污染
溫育失控:溫度波動(dòng)超過(guò)±1℃顯著影響抗原抗體結(jié)合
洗滌不徹-底:殘留物質(zhì)干擾顯色反應(yīng)
五、環(huán)境因素:容易被忽視的威脅
光照破壞:底物B對(duì)光敏感,,需避光操作
化學(xué)污染:實(shí)驗(yàn)臺(tái)面消毒劑殘留可能抑制酶活性
揮發(fā)損失:開(kāi)蓋時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致液體試劑濃度改變
六,、過(guò)期失效:時(shí)間成本不可逆
活性衰減:超過(guò)有效期后抗體效價(jià)急劇下降
標(biāo)準(zhǔn)品失效:稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品禁止二次使用
實(shí)用解決方案
采用真空采血管避免溶血
每板設(shè)置復(fù)孔提高數(shù)據(jù)可靠性
建立試劑驗(yàn)收記錄表追蹤批號(hào)性能
溫馨提示:定期校準(zhǔn)移液器,建議每季度進(jìn)行1次重力校準(zhǔn)(特別是微量移液器)