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革蘭氏染色法的基本原理
閱讀：1087 發(fā)布時間：2024-8-1一,、革蘭氏染色原理：
通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚,、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時,，因失水反而使網(wǎng)孔縮小,，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙,，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄,、外膜層類脂含量高,、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,，在遇脫色劑后,，以類脂為主的衡行外膜迅備拍速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不仿攔羨能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,，因此通過乙醇脫色后仍呈無色,，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色,。
二,、革蘭氏染色步驟：
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染,、脫色,、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法：
1）涂片固定,。
2）草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘,。
3）自來水沖洗,。
4）加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。
5）水洗,，用吸水紙吸去水分,。
6）加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進(jìn)行脫色,，20秒后水洗,，吸去水分。
7）蕃紅梁色液（?。┤?分鐘后,，自來水沖洗。干燥,，鏡檢,。
? 革蘭氏染色需用四種不同的溶液：堿性染料初染、媒染,、脫色和復(fù)染,。堿性染料初染液用于革蘭氏染色的初染液一般是結(jié)晶紫。媒染劑的作用是增加染料和細(xì)胞之間的親和性或附著力,，以某種方式幫助染料固定在細(xì)胞上,，使其不易脫落，碘是常用的媒染劑,。脫色劑是將被染色的細(xì)胞進(jìn)行脫色,，不同類型的細(xì)胞脫色反應(yīng)不同，有的能被脫色,，有的則不能,，脫色劑常用95%的酒精。復(fù)染液也是一種堿性染料,，其顏色不同于初染液,，復(fù)染的目的是使被脫色的細(xì)胞染上不同于初染液的顏色，而未被脫色的細(xì)胞仍然保持初染的顏色,，從而將細(xì)胞區(qū)分成G+和G-兩大類群,，常用的復(fù)染液是番紅。
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