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滬鼎生物|蛋白質(zhì)的濃縮技術
閱讀：588 發(fā)布時間：2024-3-15蛋白質(zhì)濃縮技術是免疫學中常用的手段,，小編給大家介紹幾種常用的濃縮技術,。
一,、透析袋濃縮法
利用透析袋濃縮蛋白質(zhì)溶液是應用最-廣的一種,。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋（無透析袋可用玻璃紙代替），結扎,，把高分子（6000-12000）聚合物如聚乙二醇（碳蠟）,、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外,，也可將吸水劑配成30％-40％濃度的溶液,，將裝有蛋白液的透析袋放入，吸水劑用過后,，可放入溫箱中烘干或自然干燥后,，仍可再用。
二,、冷凍干燥濃縮法
這是濃縮蛋白質(zhì)的一種較好的辦法,，它既可以使蛋白質(zhì)不容易變性，又可以保持蛋白質(zhì)中固有的成分,，它是在冰凍狀態(tài)下直接升華去除水分,。具體做法是將蛋白液在低溫下冰凍，然后移置干燥器內(nèi)（干燥器內(nèi)裝有干燥劑,，如NaOH,、CaCl2和硅膠等），密閉,，迅速抽空,，并維持在抽空狀態(tài)。數(shù)小時后即可獲得含有蛋白的干燥粉末,。干燥后的蛋白質(zhì)保存方便,，應用時可配成任意濃度使用。也可采用凍干機進行冷凍干燥,。
三,、吹干濃縮法
將蛋白溶液裝入透析袋內(nèi)，放在電風扇下吹,。此法簡單,，但速度慢，且溫度不能過高,。（不要超過15℃）
四,、超濾膜濃縮法
此法是利用微孔纖維素膜通過高壓將水分濾出，而蛋白質(zhì)存留于膜上達到濃縮目的。有兩種方法進行濃縮：一種是用醋酸纖維素膜裝入高壓過濾器內(nèi),，在不斷攪拌之下過濾,；另一種是將蛋白液裝入透析袋內(nèi)置于真空干燥器的通風口上，負壓抽氣,，而使袋內(nèi)液體滲出,。
五、凝膠濃縮法
選用孔徑較小的凝膠,，如SephadexG25或G50,，將凝膠直接加入蛋白溶液中。根據(jù)干膠的吸水量和蛋白液需濃縮的倍數(shù)而稱取所需的干膠量,。放入冰箱內(nèi),，凝膠粒子吸水后，通過離心除去,。
六,、濃縮膠濃縮法
濃縮膠是一種高分子網(wǎng)狀結構的有機聚合物，具有很強的吸水性能,。每克干膠可吸水120ml～150ml,。它能吸收低分子量的物質(zhì)，如水,、葡萄糖,、蔗糖、無機鹽等,，適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質(zhì),。濃縮后，蛋白質(zhì)的回收率可達80％～90％,。比濃縮膠應用方便,，直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意,，濃縮溶液的pH值應大于被濃縮物質(zhì)的等電點,，否則在濃縮膠表面產(chǎn)生陽離子交換，影響濃縮物質(zhì)的回收率,。
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