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植物細(xì)胞組織培養(yǎng)
閱讀：942 發(fā)布時(shí)間：2023-9-8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br/>
植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)的技術(shù)性強(qiáng),，要求無菌操作,，通過本實(shí)驗(yàn)可初步掌握常規(guī)的組織培養(yǎng)技術(shù)，加深對(duì)無菌操作的了解,。
二．實(shí)驗(yàn)原理
植物的性：植物體的任何一個(gè)細(xì)胞都具有生長分化成為一個(gè)完整植株的能力,，稱為植物的性。
植物組織培養(yǎng)就是利用植物的性進(jìn)行離體無菌植物培養(yǎng)的一門技術(shù),。植物組織培養(yǎng)按其原始意義,，就是指愈傷組織培養(yǎng)。但發(fā)展至今,，其范圍日益擴(kuò)大,，已包括植物和它的離體器官、組織,、細(xì)胞和原生質(zhì)體的離體無菌培養(yǎng),。因此，擁有幾種不同水平的培養(yǎng)技術(shù),，即整體的,、器官的、組織的,、細(xì)胞的和原生質(zhì)的培養(yǎng)技術(shù),。
本實(shí)驗(yàn)選擇豌豆為材料,，豌豆（Pisumsativum）屬豆科植物，是糧食,、飼料和重要的蔬菜作物,，也是遺傳學(xué)家和植物生理學(xué)家感興趣和樂于采用的實(shí)驗(yàn)植物，豌豆的根,、莖,、子葉、下胚軸,、上胚軸,、花芽等外植體，皆可形成愈傷組織,，其中莖尖,、幼胚、幼葉等器官可成功的再生成植株,。莖尖培養(yǎng)可包括小至十幾微米的莖尖分生組織（生長點(diǎn)）和大至幾十毫米的莖尖或更大的芽培養(yǎng),。在實(shí)踐應(yīng)用上，常采用生長點(diǎn)的培養(yǎng)使患病植物去病毒,，以達(dá)到挽救優(yōu)良品種,，提高產(chǎn)量和質(zhì)量之目的。
三．實(shí)驗(yàn)材料
儀器設(shè)備：1．酒精燈,、三角燒瓶,，培養(yǎng)皿；2．鑷子,、剪刀,、剖針；3．雙筒解剖顯微鏡,；4．光照培養(yǎng)箱或溫室,；
材料煙草無菌苗、豌豆幼苗,。
試劑
（1）MS培養(yǎng)基，植物激素：NAA,、6-BA等,；
（2）飽和漂液（次氯酸鈉）；
（3）70%酒精,、100%酒精,、酒精棉球；
（4）無菌水
四．實(shí)驗(yàn)步驟
豌豆苗的莖尖培養(yǎng)
⑴取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株,，簡取1厘米左右的莖尖,，浸入70%的酒精中1分鐘,，再浸入飽和次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘，（此步以后要求無菌）用無菌水中沖洗5次,，在滅菌的濾紙上吸干水分,，放入滅菌的培養(yǎng)皿中。
⑵在雙目解剖鏡下,，用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長錐,，用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個(gè)葉原基的生長錐。
⑶將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-芐基腺嘌呤（6-BA）的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織形成,，用封口膜將培養(yǎng)皿封好,。
（4）在恒溫培養(yǎng)箱中，26℃下,培養(yǎng)六周,，形成愈傷組織,，經(jīng)繼代后，可用于生根培養(yǎng)