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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前如何做好優(yōu)化？
閱讀：710 發(fā)布時(shí)間：2023-4-20ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化：
1,、包被液的挑選：一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，假定包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,，也能夠運(yùn)用pH7.2的磷酸鹽緩沖液,。
2、包被濃度的挑選：包被的最適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)改動(dòng),，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,，要清楚關(guān)于特定包被抗原的最適包被濃度需求通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)斷定。
3,、包被溫度的挑選：一般是4-8度條件下放置一個(gè)黑夜或許37度保溫2小時(shí),，咱們激烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的堅(jiān)持,。
4,、包被抗原的挑選：可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類(lèi)。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,，由于分子量太小,，一般難于直接吸附在酶標(biāo)板上，一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì),，比如BSA等偶聯(lián),，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：
在這一進(jìn)程中,，一般狀況下有三次加樣,，它們分別是加標(biāo)本，加酶物,，加底物,。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮,，分布不均,，應(yīng)充沛混勻宜輕緩，避免氣泡,，可上下倒置混和,，不要在混勻器上激烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝結(jié),、縮短后即可獲得。也可在板孔中參加稀釋液,，再在其參加血清標(biāo)本,，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確保混和,。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，逾越一星期測(cè)定的需低溫冰存,。