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試劑盒的實驗異常及對策分析
閱讀：1544 發(fā)布時間：2022-7-29 很多客戶在購買試劑盒的時候都會咨詢多少錢,？質(zhì)量怎么樣之類的問題。不同的細(xì)胞因子的試劑盒或其他試劑盒價格不一樣,，不同種類的試劑盒價格也不同,。上海滬鼎大鼠elisa試劑盒,，小鼠elisa試劑盒可以提高免費代測服務(wù),，也可以為您提供技術(shù)指導(dǎo),。價格合理，質(zhì)量保證,， 實驗效果安全可靠,。
試劑盒的實驗異常及對策分析
·異常：白板
·結(jié)果描述：顯色步驟結(jié)束后酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色,。
·原因分析：試劑已過有效期,，或不同試劑盒組分混用，檢查試劑的組分及批號,，確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對應(yīng)的試劑盒,。
·對策：不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。
整板的黃板現(xiàn)象可能是由于錯加其他試劑造成,，如同時操作兩對半試劑時,，測HbsAb板用于測HBsAg等；實驗前檢查試劑的組分及批號,，確認(rèn)所有組分均屬于對應(yīng)的試劑盒,。如盛標(biāo)本的試管四周常有血痂，易脫落,，應(yīng)遠(yuǎn)離酶標(biāo)板,。ELISA試劑盒超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號；試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行留存,，受高溫影響,；實驗前檢查試劑的組分及批號，確認(rèn)試劑未過期,。
孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,，孵育時間嚴(yán)格按照說明書操作，保溫期內(nèi)不宜多開門,，以免影響保溫,。花板,，一般是由于臨床標(biāo)本的收集,、處理和留存方法不當(dāng)造成，放置時間及離心轉(zhuǎn),、離心時間應(yīng)引起注意,。試劑、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡,，20分鐘左右,。
錯加、漏加試劑底物,、顯色劑 A或B 嚴(yán)格按說明書的步驟操作,，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,，以減少漏加現(xiàn)象。實驗結(jié)束后,，陰陽性對照正常,，質(zhì)控正常，但臨床標(biāo)本感覺顯色較弱,，待測標(biāo)本中可能不含強陽性標(biāo)本,，故結(jié)果可能是正常的，如有懷疑,，可復(fù)檢標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑,，酶免實驗中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑，可選用 proclin,、硫柳汞等其他防腐劑,，陰陽性對照正常，但質(zhì)控,、參考品或個別弱陽性標(biāo)本未能檢出,。
不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用酶標(biāo)對吸頭的污染以及對盛放顯色劑容器的污染都易造成黃板現(xiàn)象；避免試劑組分間的交叉污染,，確保吸頭,、容器的干凈，顯色劑在光照條件下放置過久,，實驗前已變藍(lán),，顯色劑A、B未使用前避光留存,，孵育溫度過高或孵育時間過長,；孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃，孵育時間嚴(yán)格按照說明書操作,。標(biāo)本在一周內(nèi)使用的,，可存于2-8℃，如需長期留存,，應(yīng)置于-20℃以下留存,。
不要將ELISA試劑盒長時間置于常溫下，按使用規(guī)定儲藏,。出現(xiàn)隨機(jī)性的花板,、跳孔現(xiàn)象 樣品離心不*，反應(yīng)孔內(nèi)發(fā)生凝血或殘留細(xì)胞成分,；充分離心,，3000rpm6分鐘以上。儀器設(shè)定不正確,，濾光片不匹配,，重新設(shè)定酶標(biāo)儀的參數(shù),，特別是檢查濾光片是否匹配，靈敏度過高,、板底高、高背景 終止后,，整板結(jié)果顯現(xiàn)均一的黃色或淡黃色,；或陰陽性對照、質(zhì)控正常,，標(biāo)本陰性標(biāo)本,，OD值過高。特別是洗滌時每孔未注滿洗液,，易造成花板黃板現(xiàn)象,，嚴(yán)格按說明書要求洗板。洗板及加樣過程中,，酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力,，確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,。加樣時交叉污染,； 加標(biāo)本時盡量 避免交叉污染。
關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系,，大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿,。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,，使測定方法達(dá)到很高的敏感度,。需要的樣本量取決于你的檢測項目，有些檢測項目需要血清做1:100稀釋,，甚至是更高的稀釋度,，那么幾微升血樣就夠了，有些項目只能做較低的稀釋,，甚至不稀釋,，這樣的話每孔會需要100 ul 左右
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