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試劑盒的實(shí)驗(yàn)異常及對(duì)策分析
閱讀：1497 發(fā)布時(shí)間：2022-7-29 很多客戶在購買試劑盒的時(shí)候都會(huì)咨詢多少錢,？質(zhì)量怎么樣之類的問題,。不同的細(xì)胞因子的試劑盒或其他試劑盒價(jià)格不一樣，不同種類的試劑盒價(jià)格也不同,。上海滬鼎大鼠elisa試劑盒,，小鼠elisa試劑盒可以提高免費(fèi)代測服務(wù)，也可以為您提供技術(shù)指導(dǎo),。價(jià)格合理,，質(zhì)量保證， 實(shí)驗(yàn)效果安全可靠,。
試劑盒的實(shí)驗(yàn)異常及對(duì)策分析
·異常：白板
·結(jié)果描述：顯色步驟結(jié)束后酶標(biāo)板所有孔均無顏色,。陽性對(duì)照不顯色。
·原因分析：試劑已過有效期,，或不同試劑盒組分混用,，檢查試劑的組分及批號(hào)，確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒,。
·對(duì)策：不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用,。
整板的黃板現(xiàn)象可能是由于錯(cuò)加其他試劑造成，如同時(shí)操作兩對(duì)半試劑時(shí),，測HbsAb板用于測HBsAg等,；實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào)，確認(rèn)所有組分均屬于對(duì)應(yīng)的試劑盒,。如盛標(biāo)本的試管四周常有血痂,，易脫落，應(yīng)遠(yuǎn)離酶標(biāo)板,。ELISA試劑盒超過有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào),；試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行留存，受高溫影響,；實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào),，確認(rèn)試劑未過期。
孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,，孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說明書操作,，保溫期內(nèi)不宜多開門，以免影響保溫,?；ò澹话闶怯捎谂R床標(biāo)本的收集,、處理和留存方法不當(dāng)造成,，放置時(shí)間及離心轉(zhuǎn)、離心時(shí)間應(yīng)引起注意。試劑,、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡,，20分鐘左右。
錯(cuò)加,、漏加試劑底物,、顯色劑 A或B 嚴(yán)格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,，以減少漏加現(xiàn)象,。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，陰陽性對(duì)照正常,，質(zhì)控正常,，但臨床標(biāo)本感覺顯色較弱，待測標(biāo)本中可能不含強(qiáng)陽性標(biāo)本,，故結(jié)果可能是正常的,，如有懷疑，可復(fù)檢標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑,，酶免實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑,，可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑,，陰陽性對(duì)照正常,，但質(zhì)控、參考品或個(gè)別弱陽性標(biāo)本未能檢出,。
不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用酶標(biāo)對(duì)吸頭的污染以及對(duì)盛放顯色劑容器的污染都易造成黃板現(xiàn)象,；避免試劑組分間的交叉污染，確保吸頭,、容器的干凈,，顯色劑在光照條件下放置過久，實(shí)驗(yàn)前已變藍(lán),，顯色劑A,、B未使用前避光留存，孵育溫度過高或孵育時(shí)間過長,；孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,，孵育時(shí)間嚴(yán)格按照說明書操作,。標(biāo)本在一周內(nèi)使用的,，可存于2-8℃，如需長期留存,，應(yīng)置于-20℃以下留存,。
不要將ELISA試劑盒長時(shí)間置于常溫下，按使用規(guī)定儲(chǔ)藏。出現(xiàn)隨機(jī)性的花板,、跳孔現(xiàn)象 樣品離心不*,，反應(yīng)孔內(nèi)發(fā)生凝血或殘留細(xì)胞成分；充分離心,，3000rpm6分鐘以上,。儀器設(shè)定不正確，濾光片不匹配,，重新設(shè)定酶標(biāo)儀的參數(shù),，特別是檢查濾光片是否匹配，靈敏度過高,、板底高,、高背景 終止后，整板結(jié)果顯現(xiàn)均一的黃色或淡黃色,；或陰陽性對(duì)照,、質(zhì)控正常，標(biāo)本陰性標(biāo)本,，OD值過高,。特別是洗滌時(shí)每孔未注滿洗液，易造成花板黃板現(xiàn)象,，嚴(yán)格按說明書要求洗板,。洗板及加樣過程中，酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力,，確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,，確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈。加樣時(shí)交叉污染,； 加標(biāo)本時(shí)盡量 避免交叉污染,。
關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系，大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿,。由于酶的催化效率很高,，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度,。需要的樣本量取決于你的檢測項(xiàng)目,，有些檢測項(xiàng)目需要血清做1:100稀釋，甚至是更高的稀釋度,，那么幾微升血樣就夠了,，有些項(xiàng)目只能做較低的稀釋，甚至不稀釋,，這樣的話每孔會(huì)需要100 ul 左右
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