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急,血清出現(xiàn)沉淀怎么辦?
閱讀：1480 發(fā)布時間：2020-9-10很多小伙伴買到血清的時候會出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,什么是沉淀呢,？沉淀會影響使用嗎,？沉淀和血清質(zhì)量有關(guān)嗎？該如何處理沉淀呢,？接下來和小編一探究竟吧,！
1.什么是血清沉淀？
血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,，其成分有多種類型,，產(chǎn)生的原因有很多，主要有纖維蛋白,、磷酸鈣還有一些其它成分,。
① 纖維蛋白（Fibrin）
血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過程中,，血清采集,、過濾（3 次 0.1 μm過濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集,，形成肉眼可見的沉淀,。
下圖是血清因反復(fù)凍融而造成纖維蛋白原的凝集
② 磷酸鈣（Calcium Phosphate）
這是一種常見的沉淀成分，通常會造成血清出現(xiàn)云霧狀渾濁,。當(dāng)產(chǎn)品在 37℃保存時,，這種現(xiàn)象尤其明顯，在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點(diǎn)的存在,。這些小黑點(diǎn)在布朗運(yùn)動的作用下四處游動,，常被誤認(rèn)為是微生物污染。
③ 其他成分（Other）
血清中的其他成分也會形成沉淀,，例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等
2.血清沉淀會影響細(xì)胞培養(yǎng)嗎,？
① 細(xì)胞生長
我們在出廠前都會對血清進(jìn)行一系列質(zhì)檢測試，確保血清質(zhì)量達(dá)到嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn),。血清測試和細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)也表明,，其沉淀成分不會影響血清作為細(xì)胞培養(yǎng)添加物的表現(xiàn)。這一點(diǎn)得到了眾多客戶和其他血清供應(yīng)商的肯定,。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集,，形成肉眼可見的沉淀。
② 懷疑污染
磷酸鈣顆粒經(jīng)常會被當(dāng)成微生物污染而引發(fā)不必要的擔(dān)憂,。一般情況下,，當(dāng)操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時,，常將其存放在 4℃冰箱中觀察，并考慮接下來是否繼續(xù)使用,。但這樣會使沉淀進(jìn)一步增多,，反而會使血清更加渾濁，進(jìn)而誤以為存在血清污染,。并且,，在倒置顯微鏡下，可在血清中觀察到四處游動的小黑點(diǎn)（磷酸鈣顆粒的布朗運(yùn)動）,，更容易使人誤以為存在微生物污染,。
為防止這類誤解的產(chǎn)生，我們不建議客戶培養(yǎng)血清來驗(yàn)證是否存在污染,，而是將血清直接接種在細(xì)菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，以觀察是否有細(xì)菌的增殖,。并且,，進(jìn)行革蘭氏染色，并在油鏡（100 X 10 倍）下觀察可直接確認(rèn)是否存在微生物污染,。
3.怎樣操作可以盡量避免沉淀出現(xiàn),？
① 解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
② 解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
③ 請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量,。
④ 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。
⑤ 若必須做血清的熱滅活,，請遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,，時間過久或搖晃不均勻,，都會造成沉淀物的增多,。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。
4.出現(xiàn)血清沉淀該如何處理,？
我們建議您采用2000 rpm 離心5分鐘,，取上清使用就好，比過濾方便,，不需要另外準(zhǔn)備濾心和針筒,，又不容易污染。
5.總 結(jié)：
血清產(chǎn)品中出現(xiàn)沉淀屬于常見現(xiàn)象,，但不會影響血清的品質(zhì),，對細(xì)胞培養(yǎng)而言也是沒有任何問題的，大家可以放心使用,！
