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常見血清使用問題,你遇見過嗎?
閱讀：1433 發(fā)布時(shí)間：2020-7-151.血清使用時(shí)一定需要滅活么,？
實(shí)驗(yàn)顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),，或*沒有任何作用,，甚至因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,，像是“小黑點(diǎn)”,，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。若非必須，可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時(shí)間,，更確保血清的質(zhì)量。
2.保存血清方法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃,。若存放于4℃時(shí),，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍。
3.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,，而血纖維蛋白在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中,，亦是造成沉淀物的原因之一,。但這些絮狀沉淀物,，并不影響血清本身的質(zhì)量,。若去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜,。
5.如何避免血清中沉淀物的產(chǎn)生?
①解凍血清時(shí),，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),，非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
②解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。
③請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,，血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量,。
④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無須做此步驟,。
⑤若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多,。
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