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夏季實(shí)驗(yàn)室里的相關(guān)事宜介紹
閱讀:1136 發(fā)布時(shí)間:2019-7-24轉(zhuǎn)眼,,已經(jīng)來(lái)到了七月底,,在這個(gè)熱氣沖天的七月,,用一個(gè)字形容它,是“熱”,;用兩個(gè)字形容它,,是“很熱”,;用三個(gè)字形容它,是“非常熱”,。在這個(gè)熱氣直逼的夏天,,客戶遇到的一些常見(jiàn)問(wèn)題。
問(wèn)題一:天氣這么熱,,ELISA試劑盒開(kāi)封后剩余試劑應(yīng)該如何保存,?
答:針對(duì)已開(kāi)封的試劑盒,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,,使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢,,產(chǎn)品過(guò)期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的,。
問(wèn)題二:實(shí)驗(yàn)結(jié)果不顯色或顯色值低什么原因?
答:1.底物配制問(wèn)題或底物已失效,。
2.酶標(biāo)抗體中酶失活或效率低或漏加酶標(biāo)抗體。
3.抗原抗體不匹配,。
4.稀釋度太高,。
5.洗板次數(shù)過(guò)多,洗滌沖擊力太大等原因,。
問(wèn)題三:要驗(yàn)證某個(gè)細(xì)胞上有無(wú)該蛋白的存在,,需要做免疫組化和western blot試驗(yàn)嗎?
答:免疫組化可以用來(lái)進(jìn)行定位,,但是不能定量,,而且有時(shí)會(huì)有假陽(yáng)性,不易與背景區(qū)分,;Western blot可以特異性檢測(cè)某個(gè)蛋白質(zhì)分子,,進(jìn)行定量,但是不能定位,。
問(wèn)題四:抗原檢測(cè)出的分子量比資料上的大,,是怎么回事?
答:1.抗原形成了二聚體,。增多巰基乙醇量,,煮沸變性時(shí)間延長(zhǎng),可以打開(kāi)二聚體,。
2.蛋白本身的修飾如:糖基化,,磷酸化等
問(wèn)題五:為什么我的細(xì)胞提取液中沒(méi)有目標(biāo)蛋白,?
答:1. 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì),,換一種細(xì)胞。
2.你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了,,你必需加入PMSF,,抑制蛋白酶活性,。
3.你的抗體不能識(shí)別目標(biāo)蛋白,多看看說(shuō)明,,看是否有問(wèn)題,。
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