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ELISA實驗該如何洗滌
閱讀：1858 發(fā)布時間：2019-5-22 小滿已過，再次迎來了ELISA試劑盒科研高峰期，歡迎各位朋友們采購我司試劑盒產品,，我們將提供全程技術指導服務及代測，為您的實驗帶來幫助及節(jié)省時間,。上海滬鼎生物今天有技術分享給大家,，有需要了解更多的可以關注收藏我公司商鋪地址。
在ELISA實驗中,，洗滌是關鍵步驟之一,。而有一些參數(shù)會影響洗滌步驟的效果，這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,，這兩者都能調整,，以降低背景(殘留量)和差異。下面我們就一起來看看今天的重點內容,，上海滬鼎生物與您談說ELISA抽吸的操作技巧,。
殘留液體中包含未結合的抗原或抗體，它們會增加背景信號,。殘留量越小,，殘留液體越少，轉移到下一步的干擾液體也就越少,。吸液高度會明顯影響殘留量,；如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加,。反之,，如果洗滌吸頭壓著反應孔底部，那么也會使吸液效率降低,，殘留量增加,。
目前的洗板機一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動的。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動,，而剛性洗頭則固定在適當?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復雜,，因為你需要非常仔細地調整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板,，那可能會很耗時,。在使用浮動洗頭時，吸頭會降到反應孔的底部,。調整高度就不是很重要,，因此洗頭會下降到底部。
抽吸的位置也對殘留量有著重要影響,；如果每個孔只使用一個抽吸點(這很常見,，因為更快),，那么抽吸的位置需要優(yōu)化,。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應孔的中間,，即使這是所有洗頭zui常見的默認位置,。一般來說，*位置在孔中間與孔壁之間的某處,。反應孔的形狀也會影響殘留量,。C形底(平底圓角)的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。
ELISA試劑盒如果沒有自動洗板機,，采用手工洗滌,，那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器,，采用倒吸的方法進行洗滌,；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放,，將洗滌液注滿各孔,，但盡量避免漏液，以每孔300 μl為宜,；板洗次數(shù)一般為3次,，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒,；盡量減少洗液殘留量,，推薦每次洗板后進行拍板，并及時更換吸水紙,，避免吸水紙的碎屑粘到反應孔內,。
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