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細(xì)胞株培養(yǎng)技術(shù)重點(diǎn)歸納
閱讀:1587 發(fā)布時(shí)間:2019-1-18細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在,。國內(nèi)資深的細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。下面滬鼎小編就為您分享細(xì)胞株培養(yǎng)技術(shù)的幾大要點(diǎn),,趕緊拿起小本本記好了,!
一、取材
細(xì)胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,,取材時(shí)避免用壞死組織,,要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料,。取材后盡快培養(yǎng),,因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存,。細(xì)胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織,。
二、成纖維細(xì)胞排除
在細(xì)胞株培養(yǎng)中?;祀s有一些成纖維細(xì)胞,,培養(yǎng)時(shí)能與瘤細(xì)胞同時(shí)生長,,并常壓過癌細(xì)胞,導(dǎo)致癌細(xì)胞生長受阻以至消失,,應(yīng)仔細(xì)排除,。排除方法常有:機(jī)械刮除法、反復(fù)貼壁法,、消化排除法,、膠原酶消化法等。
三,、提高細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),,細(xì)胞株要經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,,須采用一些特殊措施,。如:用適宜底物,鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等,。用細(xì)胞生長因子,,根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子,如胰島素,,雌激素等,。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。
總之,,在細(xì)胞株待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升,,并出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊后,可轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,,加培養(yǎng)基,,常溫培養(yǎng)半個(gè)月,一般每隔一周觀察一次,,決定是否換液,、傳代,靠譜的細(xì)胞株的每個(gè)步驟都至關(guān)重要,。細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后凍存,,凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔。另外,,上海滬鼎專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,,涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,,滿足您實(shí)驗(yàn)所需,以實(shí)現(xiàn)與客戶的雙贏,完善的庫存及供應(yīng)體系以及穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù),,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng),。歡迎您前來咨詢與選購。