技術(shù)文章
ELISA技術(shù)參數(shù)之準(zhǔn)確度/精密度
閱讀:1534 發(fā)布時間:2018-3-21 ELISA試劑盒您經(jīng)常會聽見它的好,,但具體好在哪兒,,您也不所得之,!
一、ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度
通常以回收率,、定值血清的靶值范圍,、對照試驗及干擾試驗的結(jié)果來分析判斷:
1. 回收試驗 回收率越接近100%,準(zhǔn)確率越高,,一般以100%±5%為合格,。
2. 定值血清的測定 對于某些無法準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)物的試劑盒,可用低、中,、高濃度的定值血清進(jìn)行測定,,測得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格,。
3. 對照試驗 將被檢試劑盒與*的參考方法同時測定若干樣本(一般要求100份,,zui少需30份),計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程,。
4. 非特異性與干擾試驗 對維生素C,、黃疸、溶血,、乳糜等因素的耐受程度,,干擾值越小越好。
二,、ELISA試劑盒精密度
試劑的瓶間差異,、批內(nèi)精密度和批間差異三組測定的平均值之間應(yīng)無顯著差異,否則,,試劑盒的均一性不符合要求:
1. 瓶間差異:同一試劑盒,,取10瓶試劑復(fù)溶,測定同一樣品的含量,,求平均值,、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù),。
2. 批內(nèi)精密度:同一樣品用同一瓶試劑測定10次,,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差,、變異系數(shù)
3. 批間差異:同一樣品,,用不同批號的10瓶試劑測定,求平均值,、標(biāo)準(zhǔn)差,、變異系數(shù)
三、線性范圍
指該試劑盒按其說明使用時可準(zhǔn)確測量的范圍,。被檢樣品的含量超出測定線性范圍,,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測定才能得到準(zhǔn)確結(jié)果,。試劑盒的測定線性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個指標(biāo),,也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一。
四,、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點是抗干擾作用,。
五、靈敏度:在終點法靈敏度以特定波長下1cm光徑時單位濃度的吸光度值表示。
六,、穩(wěn)定性
·原包裝試劑的穩(wěn)定性,;
·復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定性;
·不同溫度下的保存期,。