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想做ELISA實(shí)驗(yàn),,那都不是難事
閱讀:1897 發(fā)布時(shí)間:2017-3-21用ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)雖說(shuō)操作方法簡(jiǎn)便快速,但是操作技術(shù)的影響也是檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵因素之一,,操作者得細(xì)心,,用心。下面公司技術(shù)人員總結(jié)了幾點(diǎn),,想做ELISA實(shí)驗(yàn)的同學(xué)快來(lái)瞧瞧吧,!
一、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會(huì)自然流下去,。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔,,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
二,、液體全部加入酶標(biāo)孔后,,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,,也使其得到充分的反應(yīng),。
三、盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,,又能反映出試劑盒的精密度。
四,、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,,防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
五,、由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,,因此要避光保存。
六,、實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量,。
七,、檢測(cè)吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開(kāi),將其預(yù)熱30min以上。
八,、孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性,。
九,、底物為T(mén)MB,避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
十,、要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),,lmL的水可以看作是lg,、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
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