一、背景原理分析:
1.生物分子表面大都含或強或弱的疏水區(qū)域,,在不同環(huán)境下,,與各種疏水介質產(chǎn)生不同強弱和結合。
2.高離子強度可加強疏水性,。和離子交換剛剛相反,,高鹽吸附,低鹽洗脫,。經(jīng)洗脫樣品又可直接或稍加稀釋后上,。
3.其它層析柱,做為連接下游和層析步驟的橋梁,。并可*取代傳統(tǒng)的鹽析沉淀技術,,更符合工業(yè)生產(chǎn)要求。
4.比反相層析介質的配體密度低許多,,無需有機溶液劑洗脫,,保存生物活性。配體種類繁多,,提供寬廣的選擇性,。
二、疏水層析也稱疏水作用層析(hydrophobicinteractionchromatographyHIC),。蛋白質表面一般有疏水與親水基團,,疏水層析是利用蛋白質表面某一部分具有疏水性,與帶有疏水性的載體在高鹽濃度時結合,。在洗脫時,,將鹽濃度逐漸降低,因其疏水性不同而逐個地先后被洗脫而純化,,可用于分離其它方法不易純化的蛋白質,。
三、HIC配基基團一般為丁基、苯基,、辛基,,其碳鏈分別為C4,C6(苯環(huán))和C8。一般來說,,碳鏈越長,,表面疏水性越高。影響疏水作用的因素包括:鹽濃度,,溫度,,pH,表面活化劑和有機溶劑,。疏水層析的應用與離子交換層析的應用剛好互補,,因此,可以用于分離離子交換層析很難或不能分離的物質,。
四,、優(yōu)勢特點:
可提供從分析到全生產(chǎn)規(guī)模的所有包裝尺寸;
化學穩(wěn)定的瓊脂糖基質,;
可在高和低配體密度,、交替交聯(lián)水平和不同珠粒尺寸下生產(chǎn),以優(yōu)化分離介質,;
所有版本都可以按比例放大并生產(chǎn),,以供GMP使用。
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