實(shí)驗(yàn)室中所用的玻璃層析柱有兩種形式:
一是下部帶有活塞的玻璃管,活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的,,這樣可以不涂真空油脂,,以免污染產(chǎn)品。如果使用普通的玻璃活塞,,則真空油脂要小心地涂薄涂勻,。
另一種是將玻璃管下端拉細(xì),套上一段彈性良好的管子,。這段管子必須是不能被淋洗劑溶解的,,普通橡皮管一般不可充作此用,因?yàn)橄鹌ひ妆宦确?、苯、THF等溶劑溶脹,,而聚乙烯管子對(duì)大多數(shù)溶劑是惰性的,,所以常常使用。用一只螺旋夾控制流速,,此外,,薄膜塑料柱因使用方便、節(jié)省淋洗劑,、減少蒸發(fā)量等優(yōu)點(diǎn),,應(yīng)用日趨廣泛,。薄膜塑料柱總是以扁平成卷保存的,兩側(cè)常有很深的折痕,。使用前需將裁取的一段薄膜管一端扎緊,,另一端套在一段玻璃管上并用棉線扎緊。將這段玻璃管穿過一個(gè)單孔塞,。然后將薄膜管放進(jìn)一根又粗又長(zhǎng),,下端拉細(xì)了的玻璃管內(nèi),使塞子塞緊大玻璃管的口,。用水泵自大玻璃管下端抽氣,,薄膜柱即因內(nèi)部壓強(qiáng)大于外部而自行展圓。待裝入吸附劑后在其下部扎幾個(gè)小孔即可使用,。
層析柱的尺寸根據(jù)被分離物的量來確定,,其直徑與高度之比則根據(jù)被分離混合物的分離難易而定,一般在1∶8到1∶50之間,。柱身細(xì)長(zhǎng),,分離效果好,但可分離的量小,,且分離所需時(shí)間長(zhǎng);柱身短粗,,分離效果較差,但一次可以分離較多的樣品,,且所需時(shí)間短,。如果待分離物各組分較難分離,宜選用細(xì)長(zhǎng)的柱子,,如果要處理大量的較易分離的或?qū)Ψ蛛x純度要求較低的混合物,,則可選用粗而短的柱子。最常使用的層析柱,,直徑與長(zhǎng)度之比在1∶8到1∶15之間,。
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