影響色譜柱性能的物理參數(shù)
(1)硅膠純度
硅膠純度和殘留金屬離子濃度,,硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形,,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾,。
(2)色譜柱尺寸
填料床的長度和內(nèi)徑,,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,,但也會升高壓力和導致峰展寬,;寬柱徑,提高載樣量,,但也會增加橫向擴散,,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑,,可減少橫向擴散,,但壓力較大,對系統(tǒng)要求較高,。
(3)顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高,、重現(xiàn)性好、柱床結構均勻,,不規(guī)則形柱床結構不均勻,、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬,;平均顆粒直徑,,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高,。粒徑分布越廣則柱效越低,,壓力越大。
(4)顆粒表面積
顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,,以m2/g表示,,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度,。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài),,更適合梯度洗脫程序。
(5)孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸,,范圍是80~300Å,,大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間,,改善分離,,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
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