不同的氨基酸帶有不同化學(xué)性質(zhì)的側(cè)鏈基團,，有的帶有堿性側(cè)鏈，有的帶有酸性側(cè)鏈,，由此組成的蛋白質(zhì)具有不同數(shù)目的堿性基團和酸性基團,，這些基團會使蛋白質(zhì)在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷，整個蛋白質(zhì)分子帶正電荷多,，即為堿性蛋白(等電點偏向酸性),；整個蛋白質(zhì)帶負電荷多，即為酸性蛋白質(zhì)(等電點偏向酸性),。利用蛋白質(zhì)的兩重性(酸堿性)及與酸性和堿性染料離子形成鹽的能力,，在pH=2.2（即所有蛋白質(zhì)等電點之下），全部蛋白質(zhì)能被固綠染色；在pH=8.1~8..2范圍內(nèi),，堿性蛋白質(zhì)被固綠染色,。

Leagene酸性固綠染色液是利用酸性蛋白質(zhì)與帶有正電荷的酸性染料固綠結(jié)合進行染色，細胞中含量豐富的酸性蛋白主要存在于細胞質(zhì)和核仁中,，因此染色后細胞質(zhì)和核仁大部分被染成綠色,。由于酸性條件pH為2.2上下，在所有蛋白質(zhì)等電點之下,，因此全部蛋白質(zhì)能被固綠染色,，因此，酸性固綠染色液也被稱作總蛋白固綠染色液,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。