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分枝桿菌的細胞壁內含有大量脂質包圍在肽聚糖的外面, 所以分枝桿菌一般不易著色,，傳統(tǒng)的染色方法要經過加熱和延長染色時間來促使其著色,。分枝桿菌中的分枝菌酸與染料一旦結合后，就很難被酸性脫色液脫色,，故名抗酸染色,，其中代表性的是結核桿菌Ziehl－Neelsen染色法,，該法是WHO推薦熱染的方法。
Leagene(改良Kinyoun冷染法)屬于冷染色液,，無需加熱,，相對較抗酸熱染液安全，其染色原理是在室溫條件下分枝菌酸與復紅結合成復合物,，經復染后,，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質為藍色,，該染色液較Kinyoun冷染法要淺,，更適用于抗弱酸酸染色。該試劑僅用于科研領域,，不適用于臨床診斷或其他用途,。
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