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更新時(shí)間:2025-05-09 22:10:45瀏覽次數(shù):54次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)破膜劑亦稱通透液,,通常可以通過(guò)使用有機(jī)溶劑例如甲醇,、丙酮等,,或者使用去垢劑例如Triton X-100,、Saponin等來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)于細(xì)胞膜的通透,。
甲醇或丙酮等有機(jī)溶劑,一方面可以溶解細(xì)胞膜和核膜從而充分暴露細(xì)胞漿和細(xì)胞核中的目的蛋白等,,另一方面也可以使細(xì)胞內(nèi)的蛋白變性起到固定的作用,。其優(yōu)點(diǎn)是操作比較簡(jiǎn)單,一步處理可以同時(shí)實(shí)現(xiàn)固定和通透,,缺點(diǎn)是膜蛋白也會(huì)被溶解掉并且有些蛋白變性后不利于后續(xù)的檢測(cè),,因此有機(jī)溶劑使用相對(duì)較少,僅用于一些要求比較粗糙的檢測(cè),。Triton X-100是常用的通透試劑,,可以通透細(xì)胞膜和核膜,作用原理是非特異性地溶解細(xì)胞膜,,缺點(diǎn)是不利于膜蛋白的檢測(cè),,但當(dāng)使用多聚甲醛進(jìn)行交聯(lián)和固定后,相當(dāng)一部分膜蛋白會(huì)被交聯(lián)固定,,從而不會(huì)被Triton X-100溶解,,因此后續(xù)仍然能檢測(cè)到。Saponin可以特異性地溶解細(xì)胞膜中的,,從而實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞膜上選擇性地打孔,,其優(yōu)點(diǎn)是適合于細(xì)胞膜蛋白的檢測(cè),特別適合通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜上的標(biāo)志性蛋白,,缺點(diǎn)是對(duì)于一些含量低的細(xì)胞通透效果差,,通透效果弱于Triton X-100和有機(jī)溶劑,并且不能通透含量很低的核膜和線粒體膜,。對(duì)于凝集素(lectin)的檢測(cè),,含Triton X-100等非特異性去垢劑的通透液的優(yōu)于主要含Saponin的通透液。
LeagenePBS-Saponin溶液(破膜劑,0.3%)亦稱為免疫染色通透液,主要由PBS磷酸鹽緩沖液 (0.01M,pH7.4),、0.3%Saponin組成,,可以用于免疫染色等多種原位檢測(cè)時(shí)細(xì)胞樣品、冰凍或石蠟切片的通透處理,,有助于暴露抗原,、核酸等作用靶點(diǎn),使抗體,、探針或標(biāo)記物等更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),,從而確保染色等的檢測(cè)效果。本產(chǎn)品通透能力較強(qiáng),,推薦用于各種常規(guī)的免疫熒光,、免疫組化、免疫細(xì)胞化學(xué),、流式檢測(cè)等中細(xì)胞的通透,,特別適合細(xì)胞膜蛋白的檢測(cè)。本產(chǎn)品不會(huì)溶解細(xì)胞膜,,不會(huì)影響流式檢測(cè)時(shí)的光散射,。但本產(chǎn)品不推薦用于檢測(cè)細(xì)胞核及線粒體內(nèi)的蛋白。本產(chǎn)品為即用型工作液,,可以直接使用,,無(wú)需稀釋。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,,不適用于臨床診斷或其他用途,。
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