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人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)XP-A1008

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2024-09-07 07:16:02瀏覽次數(shù):1280次

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使用目的為定量測(cè)定活化的目標(biāo)濃度的血清,,血漿,,組織勻漿,,細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物液體,。研究使用不僅是用于診斷或治療程序,。如果你有任何問題,,請(qǐng)上海義森生物科技有限公司

人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒

Elisa Biotech系列ELISA試劑盒中文指南

實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度。
 
樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于2000g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè),,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8℃ 2000g離心30分鐘,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:2000g離心20分鐘,,取上清即可檢測(cè),,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
Elisa Biotech生產(chǎn)的各項(xiàng)指標(biāo)ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍適中,。經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),因此,,實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。
 
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
 
試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標(biāo)板
12孔×8條
12孔×4條
標(biāo)準(zhǔn)品
0.5mL*6管
0.5mL*6管
按說明書復(fù)溶
樣本稀釋液
10mL
10mL
檢測(cè)抗體-HRP
10mL
5mL
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書稀釋
底物A
6mL
3mL
底物B
6mL
3mL
終止液
6mL
3mL
封板膜
2張
2張
說明書
1份
1份
自封袋
1個(gè)
1個(gè)
 
注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果,。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑,。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值,。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果,。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射,。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體,。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性,。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,,所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
 
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,,每管已標(biāo)定濃度,,并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液,,蓋好后靜置10分鐘以上,,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解,使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度,。
2. 2洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
 
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL,;空白孔不加。
4. 除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4-5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值,。
 
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度

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