三、胎牛血清的選擇

市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,，魚龍混雜,，很多科研工作者,，特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣,。本人根據(jù)十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗(yàn),，總結(jié)如下：

一、外觀

拿到血清,，zui先接觸的是血清外觀,，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說，外觀的判斷尤為重要

1,、顏色

根據(jù)血紅蛋白含量的不同,，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,，實(shí)際上,，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,，良好的操作能降低血清的溶血,。

國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集,，所以很少會(huì)有溶血,，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然,，國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清,。

進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)檎嬲奶ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂,。

總的來說，國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進(jìn)口的血清,，質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,，如Gibco 16000,，差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,，熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,，甚至咖啡色,。

2,、沉淀

很多血清客戶,，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,，從而懷疑血清的質(zhì)量問題，這是沒有根據(jù)的,。

血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,，對(duì)血清質(zhì)量沒有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多,，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān),。

國(guó)產(chǎn)的血清，大多來自北方,，由于價(jià)格低廉,，保存環(huán)境都不好，從采血,、冷凍,、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過多次凍融，每次凍融過程,，就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,，這樣，血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,，很少有沉淀產(chǎn)生,。

進(jìn)口的胎牛血清，過濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,，生產(chǎn)后的成品也是清澈的,，但隨著時(shí)間的推移，血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀,。當(dāng)然,，進(jìn)口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右,，血清中的各種蛋白含量明顯偏高,，生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁，甚至有大量沉淀,。

當(dāng)然,，購(gòu)買回來的血清都是冰凍狀態(tài)，使用時(shí)需要融化,，融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,，否則沉淀相對(duì)較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,，但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙,。

3、澄清度

進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,，表現(xiàn)為稀薄,、清淡,，而國(guó)產(chǎn)血清，因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,，相對(duì)而言更加粘稠,，顏色略深，這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,，但把兩者進(jìn)行對(duì)比,，可容易分辨。

四,、胎牛血清使用中的常見問題

1,、 如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。

長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,，并避免反復(fù)凍融,。

我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),，請(qǐng)勿超過一個(gè)月,。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。

2、血清中包含絮狀沉淀,，它們是什么,，怎么處理?

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀，離心血清(400g,，1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解,。所以,，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失,。

4,、 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。

(2) 血清分裝凍存時(shí),，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一,。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

(4) 勿將血清置于37℃太久,，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,，從而影響血清的品質(zhì),。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。

(6) 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,，時(shí)間過久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多。