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上海雷根達(dá)科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物
試用裝
免疫學(xué)試劑
細(xì)胞生物學(xué)試劑
分子生物學(xué)試劑
病理染色液
原料
標(biāo)準(zhǔn)溶液
檢測(cè)試劑盒
常規(guī)試劑

(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2015/9/29閱讀:2046
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(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù)服務(wù) ——科研合作/成果轉(zhuǎn)化,,!

 服務(wù)內(nèi)容
    您只需將需要檢測(cè)的動(dòng)物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)種類和檢測(cè)指標(biāo)(介素類,、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)告知我司業(yè)務(wù)人員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,,3周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶手中,!
 質(zhì)量保證
    我公司提供的檢測(cè)用所有試劑,適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本,,靈敏度*,多年專業(yè)酶免服務(wù),,我們保證對(duì)所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到底,,每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果都真實(shí)可靠,!
 注意事項(xiàng)
    在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),,對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。因冰室與室溫存在一定溫差,,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,,所以避免反復(fù)凍融,。代測(cè)放免標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說(shuō)明書,具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通,。
 液體類標(biāo)本
    包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
*血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
*血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
*尿液:
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行,。
*細(xì)胞培養(yǎng)上清:
    檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
*組織標(biāo)本:
    切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
  ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟: 
1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,,多肽濃度2ug/ml,,0.1ml/孔,4oC過(guò)YE,,洗凈,。
2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,,37oC1h,,洗凈。
3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,,37oC 30分鐘,,洗凈。
4.稀釋辣根過(guò)氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,,洗凈,。
5.顯色:TMB顯色
A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.
B液:5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml ,。
終止液:2N硫酸
A液,、B液各一滴,比光顯色10分鐘,,終止液一滴,。
6.450nm 波長(zhǎng)測(cè)OD值

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