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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物
試用裝
免疫學(xué)試劑
細(xì)胞生物學(xué)試劑
分子生物學(xué)試劑
病理染色液
原料
標(biāo)準(zhǔn)溶液
檢測(cè)試劑盒
常規(guī)試劑

Satb2基因?qū)崟r(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品的制備及應(yīng)用研究

時(shí)間:2013/3/3閱讀:6232
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【Author】 ZHANG Dan-fang,TANG Shi-jie,MAO Xiao-yan,XU Jin-hua,PENG Li-hong(Cleft Lip and Palate Treatment Center,The Second Affiliated Hospital,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China)

【機(jī)構(gòu)】 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院唇腭裂中心汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院唇腭裂中心 廣東汕頭515041,; 廣東汕頭515041,;

【摘要】 目的:制備用于Satb2基因?qū)崟r(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的標(biāo)準(zhǔn)品,。方法:提取胚胎上頜突組織總RNA,行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)獲得*鏈的cDNA,再通過PCR回收獲得預(yù)期Satb2基因片段;通過T-A克隆將該片段插入pGMT質(zhì)粒載體;大量提取質(zhì)粒,定量后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作和實(shí)時(shí)熒光定量PCR。結(jié)果:重組質(zhì)粒經(jīng)PCR擴(kuò)增及序列測(cè)定表明,pGMT/Satb2基因已成功克隆,。結(jié)論:所構(gòu)建的pGMT/Satb2基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用Taqman熒光探針技術(shù)建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系好,靈敏度和特異性高,準(zhǔn)確可靠,此法可作為實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Satb2基因的標(biāo)準(zhǔn)方法,。

 
【文內(nèi)圖片】

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