紫外可見分光光度計(jì)不穩(wěn)定時(shí)檢查的方法有以下幾種:
?、匐娫词欠穹€(wěn)定 因?yàn)楣庾V儀器的不穩(wěn)定,,90%以上是電源引起的。氘燈恒流源(300mA)若波動(dòng)1%,,則發(fā)出的光通量波動(dòng)6.7%,;鎢燈橫壓源(12V)若波動(dòng)1%,則發(fā)出的光通量波動(dòng)3. 4%。所以電源的穩(wěn)定性非常重要,。紫外可見分光光度計(jì)的電源很多,,有交流供電電源(即市電電源)、光源電源,、光電倍增管直流高壓電源,、放大器的工作電源等。每一種電源都會(huì)直接影響儀器的穩(wěn)定性,。當(dāng)儀器出現(xiàn)不穩(wěn)定時(shí),,應(yīng)該根據(jù)有關(guān)測試方法,認(rèn)真檢查,、測試,,保證各電源的指標(biāo)符合要求。
?、谠嚇邮欠癖还饨? 由于紫外光照射到樣品上時(shí),,有些樣品會(huì)發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)(光解),使樣品濃度變化,,造成測試數(shù)據(jù)的不穩(wěn)定,。如酞丁胺、維生素B12等,。
?、蹨y試波長選擇是否合適 因?yàn)椴煌牟ㄩL時(shí),其摩爾吸光系數(shù),;£)不同,;而不同的摩爾吸光系數(shù)時(shí),,;測試靈敏度不同,;當(dāng)選擇的測試波長不是佳波長時(shí),可能會(huì)因?yàn)樾盘?hào)不同(有時(shí)信號(hào)太弱),,產(chǎn)生波動(dòng),。所以,要選擇大波長作為測試波長,。
?、苤車h(huán)境是否有干擾 當(dāng)儀器不穩(wěn)定時(shí),要認(rèn)真查看周圍有無電場,、磁場的干擾;是否有振動(dòng)源存在(周圍如果有飛機(jī)起飛和降落,,也會(huì)引起紫外可見分光光度計(jì)的不穩(wěn)定),。
⑤溶劑是否揮發(fā) 由于溶劑揮發(fā),會(huì)使試樣濃度不斷變化,,致使測試結(jié)果不穩(wěn)定(數(shù)據(jù)偏高),。這時(shí),一方面要采取保護(hù)溶劑不被揮發(fā)的措施,,另一方面盡量選擇不揮發(fā)的溶劑,。
⑥雜質(zhì)引起的不穩(wěn)定 由于試樣中有雜質(zhì)的存在,,而有些雜質(zhì)本身又不穩(wěn)定(容易光解或容易揮發(fā)),,所以會(huì)使測試結(jié)果不穩(wěn)定。有時(shí)會(huì)出現(xiàn)雜質(zhì)峰,,干擾主要的測試峰,。