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分析酶標(biāo)儀的免疫吸附試驗原理
閱讀：1787發(fā)布時間：2016-1-19
酶標(biāo)儀是我們生活中應(yīng)用的非常廣泛的醫(yī)療設(shè)備,，下面就酶標(biāo)儀的免疫吸附試驗的基本原理講解一下：
(一)先將過量的特異抗體（或抗原）包被于載體（酶標(biāo)板）上,，通過抗原抗體反應(yīng)使待側(cè)物質(zhì)（抗原或抗體）和酶標(biāo)記物（用HRP-辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體或抗原）也結(jié)合在載體上（固相分離），經(jīng)洗滌去除游離的酶標(biāo)記物后,，加入底物，已經(jīng)結(jié)合在載體上的標(biāo)記酶促使底物顯色。zui終利用光電比色法,，對待測物進行定性判斷或定量測定。以上方法的檢驗靈敏度可以達到ng/ml水平,。
?。ǘ┌幻笜?biāo)板：將特異抗原溶液加入酶標(biāo)板孔內(nèi)，4℃過夜,。然后用洗滌液洗滌3次到5次（洗板機洗板）,，這樣溶液中的特異抗原被牢固吸附在酶標(biāo)板的微孔表面，形成固相抗原,，殘液及雜質(zhì)被清洗掉,。
（三）加入被測樣本液（病人血清）：樣本液中若含有待測抗體,，經(jīng)過溫育反應(yīng),，則與已包被的抗原產(chǎn)生特異結(jié)合，生成包被抗原與待測抗體的復(fù)合物，被吸附在酶標(biāo)板的微孔表面,。然后再次進行洗滌,，去除殘液及干擾物質(zhì)。
?。ㄋ模┘用附Y(jié)合物：經(jīng)過溫育反應(yīng),，生成包被抗原加待測抗體加酶標(biāo)抗原的三者復(fù)合物，同樣被吸附在微孔表面,，然后再次洗滌,，去除游離的或非特異沾附的酶結(jié)合物（洗板）。
?。ㄎ澹┘语@色液：經(jīng)過10分鐘到20分鐘的顯色反應(yīng),，被吸附的復(fù)合物中的酶與顯色底物液生成有色溶液。此時,，由于游離或非特異吸附的酶已被清除,，所以溶液顏色的深淺，僅決定于已與待測物結(jié)合的酶的量,，因此能真實反映待測物的濃度,。被固化的酶越多，顯色就會越深,，這就說明待測物的濃度越大,。
（六）加終止液：終止顯色反應(yīng),。
使用酶標(biāo)儀檢驗：把完成顯色的酶標(biāo)板放在酶標(biāo)儀儀器上進行光電比色檢驗,，儀器分別檢測空白孔、陰陽性對照孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、質(zhì)控孔和患者樣本孔的吸光度值，并自動按程序要求計算出患者樣本中待測物的濃度或進行定性分析,。
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