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PCR儀反應液污染處理方法
閱讀：2337發(fā)布時間：2016-5-25
PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而,，在PCR儀使用時對于環(huán)境要求很高,，為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況，應該了解關于反應液受到污染時,，反應液處理方法：
l 紫外照射法：未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進行紫外照射,，注意事項與方法同上述UV照射法；
l 內切酶法：選擇識別4個堿基的內切酶（如Msp I和Taq I等）,，可同時選擇幾種，以克服用一種酶只能識別特定序列的缺陷,，室溫作用1h 后加熱滅活進行PCR；
l DNase I法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5U DNase I,，室溫反應30 min后加熱滅活,，然后加入模板和Taq聚合酶進行正常PCR擴增。該方法的優(yōu)點是不需要知道污染DNA的序列,；
l g射線輻射法：1.5kGy的輻射可*破壞0.1ng基因組DNA,，2.0 kGy可破壞104拷貝的質粒分子，4.0 kGy仍不影響PCR,，但高于此限度會使PCR擴增效率下降,。引物可受照射而不影響PCR，g射線是通過水的離子化產生自由基來破壞DNA的,。
PCR儀的使用要求很高,，因此不允許在實驗過程中出現一絲錯誤,，尤其是任何與實驗有關的物品的污染情況。上述關于PCR儀反應液污染情況的及時處理方法一定能幫助您在實驗中出現類似情況時及時處理,。
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