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VX2細(xì)胞株的培養(yǎng)與操作
閱讀：341發(fā)布時(shí)間：2024-10-14
VX2細(xì)胞株,，也被稱為VX2兔間變表皮鱗癌瘤株，是一種重要的科研用細(xì)胞株,。
VX2細(xì)胞株特性與參數(shù)：
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
含量：通常大于1x10^6個(gè)/mL
污染檢測(cè)：支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
培養(yǎng)基：常用EMEM培養(yǎng)基添加10%的胎牛血清(FBS),，也有使用DMEM+10%FBS或89%EMEM+10%FBS+1%雙抗等配方
傳代方法：傳代比例通常為1:2至1:4,，傳代后兩天左右換液
凍存條件：使用90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO(或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO)進(jìn)行凍存，液氮儲(chǔ)存
VX2細(xì)胞株培養(yǎng)與操作：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入培養(yǎng)基混合均勻后離心,，棄去上清液，補(bǔ)加培養(yǎng)基后吹勻,，然后接種至培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。
細(xì)胞傳代：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),，可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。傳代過(guò)程中需要使用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量的胰酶進(jìn)行消化,，待細(xì)胞大部分變圓并脫落后加入培養(yǎng)基終止消化，然后進(jìn)行離心,、重懸和接種,。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。凍存前需要棄去培養(yǎng)基,，使用PBS清洗一遍后加入胰酶進(jìn)行消化,，細(xì)胞脫落后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，然后進(jìn)行離心,、重懸和凍存,。
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