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關(guān)于細胞株你都了解嗎,?
閱讀:1975發(fā)布時間:2020-12-10
細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株,,是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,,由單細胞增殖形成的細胞群,。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在,。特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在,。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,,生長穩(wěn)定,,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,,引起細胞本身生物化學過程的改變,,細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受,。
細胞株的培養(yǎng)小技巧:
1. 買細胞要去靠譜的地方買,,比如 ATCC 或者然泰生物,。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖,、傳代,、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細胞,,還是別人惠贈的細胞,,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后更換一次培養(yǎng)基,。
3. 發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉,,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時。細菌污染,、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),,支原體污染的話,細胞會長的慢,,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下,。
4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,,比如說 MDA-MB-231,,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,,比如 BT474,,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,。這就需要要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索,。
5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護,。胰酶消化不能過久,,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,。每天都要去看一下細胞,,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況,。
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