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生化分析儀的單波長和雙波長具體指的是什么,?
閱讀:4981發(fā)布時間:2020-3-23
在生化分析儀的使用說明中我們發(fā)現(xiàn)有這樣兩個概念,,即單波長,、雙波長,但對于很多新手來說,,對此并不了解,,下面我們來仔細(xì)說說。
生化分析儀采用一個波長檢測物質(zhì)的光吸收強(qiáng)度的方式稱為單波長方式,。當(dāng)反應(yīng)液中含有一種組分,,或在混合反應(yīng)液中待測組分的吸收峰與其它共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時,可以選用,。
在吸光度檢測中,,使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式,。當(dāng)反應(yīng)液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性時,,采用雙波長方式更好,。
雙波長的作用:雙波長(di-wavelength)測定優(yōu)點(diǎn)是①消除噪音干擾;②減少雜散光影響;③減少樣品本身光吸收的干擾。從光源,,到比色杯,、單色器、檢測器的整個光路系統(tǒng)中,,均存在著隨時間發(fā)生變化的不穩(wěn)定的檢測信號,,即噪音,而雙波長檢測是同時進(jìn)行的,,兩種波長檢測產(chǎn)生的噪音基本上相同,,因而能消除噪音干擾。當(dāng)樣品中存在非化學(xué)反應(yīng)的干擾物如甘油三酯,、血紅蛋白,、膽紅素等時,會產(chǎn)生非特異性的光吸收,,而干擾測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,。采用雙波長方式測定可以部分消除這類干擾,提高檢測的準(zhǔn)確性,。
次波長的確定方法:當(dāng)被測物的主波長確定之后,,再選擇次波長。如根據(jù)甘油三酯等干擾物吸收光譜特征,,選擇次波長,,使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值,,而被測物在主,、次波長處的光吸收值應(yīng)有較大的差異。一般來說,,次波長應(yīng)大于主波長100nm,。以主波長與次波長吸光度差來計(jì)算結(jié)果。
雙波長的具體應(yīng)用:對于某些反應(yīng)速度快且無法設(shè)置為兩點(diǎn)終點(diǎn)法的分析項(xiàng)目,,尤其是單試劑分析中,,可以利用雙波長的方式來部分消除樣品本身的光吸收干擾。目前用單試劑法測定的項(xiàng)目應(yīng)用雙波長的為血清總蛋白(雙縮脲法)主波長500nm,,次波長576nm,;血清白蛋白(溴甲酚氯法)主、次波長分別為600和700nm;鈣(偶氮砷Ⅲ法)主,、次波長分別為660,、770nm;磷(紫外比色法)主,、次波長為340、405nm,,鎂(二甲苯胺藍(lán)法)主,、次波長為505和600nm。
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