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ELISA試劑盒的測定結(jié)果和標準相差太大怎么辦,?

閱讀:6186發(fā)布時間:2019-5-28

      ELISA試劑盒測定值與文獻中相差太大怎么辦,,下面看看我們來仔細說說:
 ?。?)生化測定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標的變化,。同時,要測定值,,往往是很可能甚至不可能的,。因此,追求的不是值而是相對值。
 ?。?)用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異,。因此,如果測定方法不同,,同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的,。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一。因為不同作者用同一試劑盒測定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的,。
 ?。?)同一種材料,不同處理,、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標可能發(fā)生很大變化,。因此,能夠直接用來比較的文獻資料本來就不多,。
 ?。?)當然,話說回來,,測定值如果與文獻報道相差太大,,首先應(yīng)該檢查單位是否一致,包括摩爾還是毫摩爾,,是干重,、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度,是分鐘還是秒,,等等,。其次,檢查計算是否有誤,?較后,,如果相差不是數(shù)量級,通常是很正常的,。
  ELISA試劑盒實驗結(jié)果的處理也是尤為重要的,,今日,下面為大家分享ELISA試劑盒實驗結(jié)果的小建議:
  1.ELISA實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔,,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
  2.平均OD值減去空白孔的OD值,。
  3.制作標準曲線,。以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法,。建議使用合適的軟件來作圖,,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線,、半對數(shù),、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條較合適的方程,。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,,計算出標準品的濃度,,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度較高的那條曲線,。
 

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