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T4 DNA Ligase T4噬菌體DNA連接酶
產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價 格
T8400-100 100u 535.00
說明：T4噬菌體DNA連接酶主要催化兩條DNA鏈上相鄰的5’磷酸基和3’-Qiang基之間形成磷酸二酯鍵,。它的主要用途是連接帶匹配粘端的DNA分子,，或使平端的雙鏈DNA分子互相連接或與合成接頭相連接。也可催化DNA與RNA之間以及少數(shù)RNA之間的連接,，但不能催化單鏈DNA之間的連接,。
單位定義：0.01Weiss單位的T4 DNA連接酶可以在16℃下反應(yīng)20分鐘，連接95％的1μgλDNA-HindⅢ的分解物,。
注意：一個Weiss單位的T4 DNA連接酶相當(dāng)于核酸外切酶測定中的0.2單位或60個粘性末端(New England Biolabs)
存儲緩沖液：10mM Tris-HCl(pH7.5 25℃),50mM KCl,，
1mM DTT，0.1mM EDTA和50％glycerol,。
10×反應(yīng)緩沖液：300mM Tris-HCl(pH7.8 25℃),
100mM MgCl2,，100mM DTT，10mM ATP
質(zhì)量控制：
1 活性：大于3Weiss單位/微升,。
2 藍白克隆鑒定：12Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經(jīng)內(nèi)切酶酶切產(chǎn)生的5’或3’粘性末端DNA在4℃下,，反應(yīng)16小時后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌JM109培養(yǎng),，白色菌落小于總菌落數(shù)的2％；12 Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經(jīng)內(nèi)切酶酶切產(chǎn)生的鈍性末端DNA在4℃下,，反應(yīng)16小時后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌JM109培養(yǎng),，白色菌落小于總菌落數(shù)的5％。
3 核酸內(nèi)切酶測定：20Weiss單位酶與1μg超螺旋質(zhì)粒DNA在37℃下反應(yīng)16小時,，DNA的電泳圖譜不發(fā)生變化,。
4 單鏈和雙鏈DNase測定：20Weiss單位酶與50ng同位素標(biāo)記的單鏈或雙鏈DNA反應(yīng)16小時，單鏈DNA的釋放量小于2％,，雙鏈DNA的釋放量小于1％,。
5 RNase測定：37℃時，20Weiss單位酶與50ng 3H-RNA保溫5小時,，釋放量小于1％。
6 蛋白純度：SDS PAGE 檢測純度≥90％,。
儲存條件：−20℃
From Promega M1801S
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