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酶標(biāo)板的具體分類
根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn),酶標(biāo)板有著不同的分類,。
一、根據(jù)孔數(shù),,可分為96孔,、48孔,其中96孔是現(xiàn)在zui常用的,,因?yàn)槊笜?biāo)板就是配合酶標(biāo)儀用,,現(xiàn)在的酶標(biāo)儀做出來的zui多的是96孔,所以客戶在購買時(shí)也是要96孔板,,廠家也為了適應(yīng)市場(chǎng)基本上做出來的就是96孔的,。
二、根據(jù)其底部的不同,,又分為平底的,U型底,、V型底,。平底的折射率低,適于在酶標(biāo)儀檢測(cè);U型底的酶標(biāo)板折射率較高,,方便加樣,、吸樣、混勻等操作,,可以不用放在酶標(biāo)儀上,,直接通過目測(cè)觀察顏色變化情況,從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng),。V底的酶標(biāo)板可以的吸取樣品,。
三、根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,,又分為高結(jié)合力,,中結(jié)合力和氨基化的。
1) 高結(jié)合力
此種酶標(biāo)板,,表面經(jīng)處理后,,其蛋白結(jié)合能力大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ngIgG/cm2,,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD,。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量,,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng),。抗原或抗體包被后,,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,,需使用蛋白作為封閉劑。
2) 中結(jié)合力
此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結(jié)合,,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,,其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,,可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液,。
3)氨基化
這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體,。使用合適的緩沖液和pH值,,其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力,,可用于固定溶于Triton-100,、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外,,其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性,,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用,。
四、另外根據(jù)顏色又分為透明,、黑色,、白色。
透明的是zui常用的,,用于zui一般的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn),。相對(duì)于透明的的板子,還有用于發(fā)光檢測(cè)用的不透明的板子,,一般有黑色和白色兩種,。黑色的酶標(biāo)板自身會(huì)有光吸收,所以它的信號(hào)相對(duì)于白色的板子要低很多,,因此一般用于檢測(cè)較強(qiáng)的光,,如熒光檢測(cè)。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測(cè),,常用于一般的化學(xué)發(fā)光,。另外黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題,。有些客戶會(huì)問,用一般的酶標(biāo)板可不可以進(jìn)行發(fā)光檢測(cè),,回答是不可以的,,因?yàn)橐话銖幕瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性的,也就是說各個(gè)方向上同等發(fā)射出來的,。如果用透明的板子,,光不僅會(huì)從垂直方向發(fā)散,還從水平方向發(fā)散出來,。很容易的就會(huì)通過各個(gè)孔之間的間隙和孔壁,。這樣的話,光較強(qiáng)時(shí)相鄰孔之間的影響就會(huì)很大,,因此不能用透明的酶標(biāo)板來進(jìn)行化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn),。
五、現(xiàn)在大家看到的酶標(biāo)板大多是可以拆卸的,,也就是單條可以拆下來,,也有固定的板子。單條可拆的的板子其實(shí)可以省下許多錢,,因?yàn)檫@樣的話,,當(dāng)你想用新的酶標(biāo)板時(shí),可以將酶標(biāo)板條拆下來,,買些酶標(biāo)板條就可以了,只是要考慮要配相同的型號(hào)即可,。另外,,可拆的酶標(biāo)板可以用來做體外檢測(cè),方便拆卸,。
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