SF9(昆蟲卵巢細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)教程

SF9(昆蟲卵巢細(xì)胞)特點(diǎn)：

1.細(xì)胞靜置培養(yǎng)時(shí)半貼壁生長,，也可以使用搖瓶懸浮培養(yǎng)

靜置培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞會(huì)大量附著瓶底生長,，呈半貼壁狀態(tài)，會(huì)有少部分細(xì)胞懸浮生長,；

搖瓶培養(yǎng)時(shí)可以很快適應(yīng)懸浮生長,，呈單個(gè)或小聚團(tuán)懸浮生長；

2.對(duì)溫度極為敏感

細(xì)胞于26-28℃空氣培養(yǎng),，需要盡量控制溫度,，保證細(xì)胞生長狀態(tài)；

若溫度低于26℃,，細(xì)胞生長速度會(huì)變慢,，但恢復(fù)溫度后生長速度會(huì)逐漸恢復(fù)，不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生過大傷害,；

若溫度28℃-30℃,，細(xì)胞生長嚴(yán)重受限；若溫度高于30℃,，細(xì)胞將受不可逆?zhèn)?dǎo)致無法使用,，即使溫度恢復(fù)也無法恢復(fù)正常生長狀態(tài)；

同時(shí)注意使用的培養(yǎng)基,、PBS及其他試劑應(yīng)復(fù)溫至室溫（最好26-28℃），盡量減少觀察細(xì)胞次數(shù)和時(shí)間；

3.細(xì)胞對(duì)吹打,、氣泡等機(jī)械損傷敏感

細(xì)胞操作時(shí)若吹打力度過大,、氣泡過多將嚴(yán)重影響細(xì)胞生長狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞后續(xù)存活率降低,，注意操作輕柔,；

4.細(xì)胞可以適應(yīng)多種培養(yǎng)體系

該細(xì)胞多用于真核細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)，因此針對(duì)該細(xì)胞有諸多培養(yǎng)體系,，例如Grace's Insect Medium,、SF900 II、TNM-FH,、ESF921等培養(yǎng)體系,，包括含血清的培養(yǎng)體系和不含血清的培養(yǎng)體系，可以根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)需要選擇逐步更換為合適的培養(yǎng)體系,；

5.細(xì)胞凍存存活率不高

實(shí)際實(shí)驗(yàn)過程中,，尚恩發(fā)現(xiàn)SF9細(xì)胞疑似表現(xiàn)出較低的凍存保存能力，凍存后活率會(huì)隨保存時(shí)間增加而逐漸下降,，因此若有持續(xù)培養(yǎng)該細(xì)胞或者快速復(fù)蘇進(jìn)行實(shí)驗(yàn)需求的實(shí)驗(yàn)室建議定期復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞并重新凍存以保證細(xì)胞凍存活性不會(huì)下降至無法接受的范圍,；

6.細(xì)胞貼壁培養(yǎng)后可能會(huì)伸出觸角

細(xì)胞在貼壁培養(yǎng)時(shí)，一周左右會(huì)有部分細(xì)胞伸出較長觸角,，同一個(gè)培養(yǎng)瓶培養(yǎng)時(shí)間越長,，有觸角的細(xì)胞可能越多，這是細(xì)胞自然現(xiàn)象,，非細(xì)胞交叉污染或狀態(tài)不佳,；