VRE顯色培養(yǎng)基（含增補(bǔ)劑）說明書

VRE顯色培養(yǎng)基（含增補(bǔ)劑）說明書

法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基

用于耐萬古霉素糞腸球菌（E.faecalis）和尿腸球菌(E.faecium)的鑒定和計數(shù),。

【組分】

瓊脂                               15.0g/L

蛋白胨和酵母浸出物                 20.0 g/L

色素                               27.3 g/L

鹽類                               5.0 g/L

PH                                6.8±0.2

根據(jù)需要，可以進(jìn)行經(jīng)典配方的調(diào)整或補(bǔ)充,。

【操作】

1. 稱取瓶內(nèi)干粉67.3g，用1000ml蒸餾水或純水溶解,，可以按照67.3 g/L的比例擴(kuò)大或 縮小,。
2. 將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中，充分?jǐn)嚢柚敝镰傊?溶解,。
3. 加熱至100℃，并且不斷攪拌,。如果使用高壓鍋,，請不要加壓,，加熱不能超過100℃。使用微波爐加熱時,，在煮沸后立即移出微波爐并不斷攪拌,，而后移入微波爐再加熱,，直至*溶解（大氣泡代替泡沫產(chǎn)生，大約需要2分鐘）,。
4. 把VRE基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷卻至45－50℃?zhèn)溆?，此基礎(chǔ)培養(yǎng)基為乳白色。
5. 取增補(bǔ)劑一瓶,，加入1ml 54%酒精溶解，以無菌操作把增補(bǔ)劑加入到備用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,，輕輕混合均勻(使其終濃度為60mg/L)，避免氣泡,，也可按照60mg/L的比例擴(kuò)大或縮小 。
6. 使用傾注程序：準(zhǔn)備直徑為90mm的已滅菌的帶蓋培養(yǎng)皿,，每個培養(yǎng)基接種1ml樣品,，然后傾注混合均勻的培養(yǎng)基 15±1ml，混合均勻使其凝固，倒置,，37℃培養(yǎng)16小時 ,24小時 和48小時，觀察結(jié)果 ,。
7. 如果使用表面接種程序：將培養(yǎng)基傾注于已滅菌的培養(yǎng)皿中（用前貯存于2－8℃,，避光，接種前應(yīng)先恢復(fù)至室溫）,。樣品劃線接種或者涂布接種于 培養(yǎng)基表面,，在37℃培養(yǎng)18小時，24小時和48小時,，觀察結(jié)果。

【貯存】

1,、法國科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基干粉需保存在15-30℃干燥環(huán)境中,，增補(bǔ)劑保存于2－8℃環(huán)境下,。

2,、傾注好的培養(yǎng)基在室溫可保存一天，2－8℃冰箱中避光可以貯存兩星期,。

【結(jié)果】

★ 極少數(shù)其他菌屬菌株如乳酸桿菌素可能呈現(xiàn)很小的紫色菌落。

★ 使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄,。