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DMEM低糖培養(yǎng)基基本成分和保存

無機鹽,；培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡,。此外，通過提供鈉,，鉀和鈣離子,，幫助細胞調節(jié)細胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通?？赡褪?60mOsm/kg ～320 mOsm/kg,。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,，特別是溶于強酸或強堿中的物質,。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下方法調節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統(tǒng),；大多數(shù)細胞所需pH 在 7.2 - 7.4,。但是，細胞培養(yǎng)適pH 值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同,。成纖維細胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4),。

由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進行緩沖，因此,，氣相中的CO2 濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L,；如果CO2 濃度維持在10％,，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L,。
細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換,。HEPES 是一種非離子緩沖液,，在pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴,，在高濃度時對一些細胞可能有毒,。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下,，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH 指示劑,，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。

碳水化合物；是細胞生長主要能量來源,，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分,。主要有核糖、葡萄糖,、,、丙酮酸鈉脫氧核糖和醋酸等。

維生素,；在細胞培養(yǎng)中,，盡管血清是維生素重要來源，但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長

液體培養(yǎng)基,；應于4℃冰箱避光保存,，實驗前放入37℃預熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12 個月,。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解,。如果細胞生長不良，可以再添加適量L-谷氨酰胺,。

干粉培養(yǎng)基保存,；4℃冰箱避光保存，有效期36 個月,。

相關產(chǎn)品,；

DMEM高糖，C11995500BT,，含L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉,。

DMEM高糖,，C12430500BT，含L-谷氨酰胺和HEPES,，不含丙酮酸鈉,。

RPMI164 ，C11875500BT,，含L-谷氨酰胺,。

DMEM/F12，C11330500BT,，含L-谷氨酰胺和HEPES,。

F 12，C11765500BT,，NUTRIENT MIX, HAMS,，含L-谷氨酰胺。

MEM EARLES,，C11095500BT,，含L-谷氨酰胺。

MED 199 EARLES,，C11150500BT,，含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。

另有Hyclone液體培養(yǎng)基,，GIBCO干粉培養(yǎng)基,，常備現(xiàn)貨，*,，當天發(fā)貨,。

Trizol試劑 Invitrogen 100ml 200ml          蛋白酶K MercK    100mg

潮霉素B Roche   10843555001 20ml            G418 Life Invitrogen 11811-023 1g

G418 Life Invitrogen 11811-031 5g          瓊脂糖 西班牙原裝 100g

脂質體2000 原裝 GIBCO 11668-027原裝 0.75ml 1.5ml

脂質體3000 原裝GIBCO L3000-015 原裝1.5ML