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CellWorld細(xì)胞凍存液的儲(chǔ)存條件及使用方法

閱讀:585      發(fā)布時(shí)間:2025-3-14
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 CellWorld細(xì)胞凍存液的儲(chǔ)存條件
溫度:CellWorld細(xì)胞凍存液通常需要在-20℃避光條件下儲(chǔ)存,,以確保其穩(wěn)定性和有效期(一般為24個(gè)月),。在初次融化后,若未使用完畢,,可在2~8℃避光條件下保存至少1個(gè)月,,少量蛋白析出不影響凍存效果。
容器:CellWorld細(xì)胞凍存液通常以50ml/瓶的規(guī)格提供,,應(yīng)確保容器密封良好,,避免污染。
使用方法
細(xì)胞準(zhǔn)備:
在凍存前,,請(qǐng)確保細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,,這是細(xì)胞凍存的最佳時(shí)期。
移除舊培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞兩次,,以去除殘留的血清和代謝產(chǎn)物。
使用胰酶消化細(xì)胞,,制備成細(xì)胞懸液,。
細(xì)胞計(jì)數(shù)與凍存液配制:
對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行計(jì)數(shù),,以確定細(xì)胞總數(shù)和所需細(xì)胞凍存液的量。
細(xì)胞的凍存密度通常建議為1×107 cells/mL,。
根據(jù)細(xì)胞數(shù)量,,計(jì)算出所需的細(xì)胞凍存液體積。
細(xì)胞凍存:
將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)碾x心管中,,進(jìn)行離心以收集細(xì)胞,。
棄去上清液,加入適量的CellWorld細(xì)胞凍存液,,輕輕吹打以重懸細(xì)胞,。
將細(xì)胞懸液分裝至無菌細(xì)胞凍存管中,每管通常含1~10×10^6 cells/mL,。
密封并標(biāo)記凍存管,,注明細(xì)胞名稱、代數(shù),、日期等信息,。
按照常規(guī)操作流程,將凍存管依次置于4℃,、-20℃,、-80℃進(jìn)行逐級(jí)降溫,或直接置于-80℃冰箱中儲(chǔ)存至少一年,;或者-80℃過夜后,,次日將細(xì)胞投入液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存。在液氮中,,細(xì)胞可保存數(shù)年或更長(zhǎng)時(shí)間,。
注意事項(xiàng):
在整個(gè)凍存過程中,請(qǐng)盡量在冰袋附近操作,,以保持低溫環(huán)境,,避免保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞造成損傷。
請(qǐng)確保細(xì)胞凍存管密封,,避免在復(fù)蘇過程中因壓力變化導(dǎo)致凍存管炸裂,。
在取用凍存液時(shí),應(yīng)在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作,,確保無菌條件,。
復(fù)蘇細(xì)胞時(shí),,應(yīng)從液氮罐或-80℃冰箱中迅速取出凍存管,,立即放入37℃水浴中快速解凍,避免冰晶重新結(jié)晶而造成細(xì)胞死亡,。
CellWorld細(xì)胞凍存液以其高效,、穩(wěn)定,、方便的特點(diǎn),為細(xì)胞保存提供了可靠的解決方案,。在使用時(shí),,請(qǐng)嚴(yán)格按照上述方法和注意事項(xiàng)進(jìn)行操作,以確保細(xì)胞的存活率和穩(wěn)定性,。

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