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飼料版黃曲霉B1-飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒
  • 飼料版黃曲霉B1-飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒

貨物所在地:山東濱州市

地: 山東綠都生物科技有限公司

更新時間:2025-05-21 21:00:08

瀏覽次數(shù):153

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飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中黃曲霉B1的殘留量。定量檢測飼料等樣品中黃曲霉B1的殘留。

一,、原理

飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品黃曲霉B1的殘留量。

二,、適用范圍

定量檢測飼料等樣品中黃曲霉B1的殘留,。

飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒特點及技術(shù)指標

* 檢 測 時 間 : 30 min

* 試劑盒靈敏度: 0.03ppb(µg/kg)

* 樣本處理方法簡單,,并與玉米赤霉烯酮前處理方法部分統(tǒng)一化,,節(jié)省了人力物力;

* 試劑盒提供工作濃度標準品,,使用更方便,;

* 試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:

樣本

檢測下限

回收率

飼料等

3pb

70%-120%

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應率(%)

黃曲霉B1

*

黃曲霉G1

< 1%

、所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm,、振蕩器,、離心機、刻度移液管(10 mL),、洗耳球,、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL,、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:甲醇,、去離子水

,、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

黃曲霉B1酶標板

12×8孔

2

黃曲霉B1標準品濃度*5

0.5-1 mL

3

黃曲霉B1酶標物

7 mL

4

黃曲霉B1抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

黃曲霉B1樣品稀釋液

40mL

*注:A,、B,、C、D,、E 5個標準品濃度為:0ppb,0.03ppb,,0.09ppb,,0.27ppb,,0.81ppb,,A,、B標準品各1mL,其余各0.5mL,,直接使用,。

六:溶液配制

配液1: 洗滌工作液

   用去離子水將20 ×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋。配好的洗滌工作液在4 ℃環(huán)境可保存一    個月,,用前一天取出回溫,。

配液2: 1 ×黃曲霉B1稀釋液        

   用去離子水將2 ×黃曲霉B1稀釋液按1:1體積比進行稀釋配好1 ×黃曲霉B1稀釋液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫,。

配液3: 樣品提取液

將甲醇與去離子水按V:V=4:1 體積比配制成80%甲醇,即樣品提取液,。 

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,,實驗中必須使用一次性吸頭,,吸取不同試劑時要更換吸頭,。

② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

全麥,、全玉米,、花生粕,、豆粕、乳豬料,、豬育肥料、牛飼料,、DDGS等(稀釋倍數(shù):100倍)

① 稱取粉碎樣品1.0 g ± 0.05 g離心管中,加入 10 mL 樣品提取液(配液3),, 震蕩提取1 min,;

 4000 r / min離心5 min;

  ③ 小心移取上清液100 μL 加到300μL 1 ×黃曲霉B1稀釋液中, 混勻,,取50 μL用于分析,。    

,、 酶標免疫測定程序

  • 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,,待其*回  升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻,。
  •  按標準品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標準品/樣品,、酶,、抗體:加標準品/樣品50µL到對應的微孔中,,加入黃曲霉B1酶標物50µL/孔,,再加入黃曲霉B1抗體50µL/孔,,輕輕振蕩混勻,,用蓋板膜蓋板后置37℃環(huán)境中反應20min,。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,,將孔內(nèi)液體甩干,,

加入洗滌工作液250µL/孔,每次靜置20s,,甩去孔內(nèi)液體,重復洗滌3次,,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破),。

  •  顯色:加入底物液A液50µL/孔,,再加底物    

液B液50µL/孔,,輕輕振蕩混勻,,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應10min,。

  • 測定:加入終止液50µL/孔,,用酶標儀立即  測定450nm處的吸光度值(建議用雙波長450/630nm)檢測,。

,、 結(jié)果判定

以標準品百分吸光率為縱坐標,,以黃曲霉B1標準品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標,,繪制標準曲線圖,。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,,乘以其對應的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉B1實際濃度,。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,,以便進行大量樣本的分析計算,。)

、 注意事項

洗板拍干后應立即進行下一步操作,。

反應終止液為2M硫酸,,避免接觸皮膚,。

不使用過了有效期的試劑盒,,不交換使用不同批號的試劑,。

④ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,,表示試劑可能變質(zhì),。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,,一般顯色時間為10~15min即可。若顏色較淺,,可延長反應時間到20min,,反之則減短反應時間。

 未提及樣本請致電本公司技術(shù)服務部,。

十一貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個月

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