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貨物所在地:山東濱州市
所在地: 山東綠都生物科技有限公司
更新時間:2025-05-21 21:00:08
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一,、原理
飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中黃曲霉B1的殘留量。
二,、適用范圍
定量檢測飼料等樣品中黃曲霉B1的殘留,。
三、飼料版黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒特點及技術(shù)指標
* 檢 測 時 間 : 30 min
* 試劑盒靈敏度: 0.03ppb(µg/kg)
* 樣本處理方法簡單,,并與玉米赤霉烯酮前處理方法部分統(tǒng)一化,,節(jié)省了人力物力;
* 試劑盒提供工作濃度標準品,,使用更方便,;
* 試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:
樣本 | 檢測下限 | 回收率 |
飼料等 | 3pb | 70%-120% |
試劑盒特異性:
藥物名稱 | 交叉反應率(%) |
黃曲霉B1 | * |
黃曲霉G1 | < 1% |
四、所需材料
儀器:微孔板酶標儀450 nm/630 nm,、振蕩器,、離心機、刻度移液管(10 mL),、洗耳球,、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:單道 1µL~10 µL,、10 µL~100µL
多道 50µL~300µL
試劑:甲醇,、去離子水。
五,、 試劑盒組成
序號 | 組成部分 | 96T裝量 |
1 | 黃曲霉B1酶標板 | 12×8孔 |
2 | 黃曲霉B1標準品濃度*5 | 0.5-1 mL |
3 | 黃曲霉B1酶標物 | 7 mL |
4 | 黃曲霉B1抗體 | 7 mL |
5 | 底物液A液 | 7 mL |
6 | 底物液B液 | 7 mL |
7 | 終 止 液 | 7 mL |
8 | 20×濃縮洗滌液 | 40 mL |
9 | 2×黃曲霉B1樣品稀釋液 | 40mL |
*注:A,、B,、C、D,、E 5個標準品濃度為:0ppb,0.03ppb,,0.09ppb,,0.27ppb,,0.81ppb,,A,、B標準品各1mL,其余各0.5mL,,直接使用,。
六:溶液配制
配液1: 洗滌工作液
用去離子水將20 ×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋。配好的洗滌工作液在4 ℃環(huán)境可保存一 個月,,用前一天取出回溫,。
配液2: 1 ×黃曲霉B1稀釋液
用去離子水將2 ×黃曲霉B1稀釋液按1:1體積比進行稀釋。配好的1 ×黃曲霉B1稀釋液在4℃環(huán)境可保存一個月,用前一天取出回溫,。
配液3: 樣品提取液
將甲醇與去離子水按V甲:V水=4:1 體積比配制成80%甲醇,即樣品提取液,。
七、樣本前處理
樣本處理前須知:
① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,,實驗中必須使用一次性吸頭,,吸取不同試劑時要更換吸頭,。
② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。
全麥,、全玉米,、花生粕,、豆粕、乳豬料,、豬育肥料、牛飼料,、DDGS等(稀釋倍數(shù):100倍)
① 稱取粉碎樣品1.0 g ± 0.05 g至離心管中,加入 10 mL 樣品提取液(配液3),, 震蕩提取1 min,;
② 4000 r / min離心5 min;
③ 小心移取上清液100 μL 加到300μL 1 ×黃曲霉B1稀釋液中, 混勻,,取50 μL用于分析,。
八,、 酶標免疫測定程序
加入洗滌工作液250µL/孔,每次靜置20s,,甩去孔內(nèi)液體,重復洗滌3次,,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破),。
液B液50µL/孔,,輕輕振蕩混勻,,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應10min,。
九,、 結(jié)果判定
以標準品百分吸光率為縱坐標,,以黃曲霉B1標準品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標,,繪制標準曲線圖,。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,,乘以其對應的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉B1實際濃度,。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,,以便進行大量樣本的分析計算,。)
十、 注意事項
① 洗板拍干后應立即進行下一步操作,。
② 反應終止液為2M硫酸,,避免接觸皮膚,。
③ 不使用過了有效期的試劑盒,,不交換使用不同批號的試劑,。
④ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,,表示試劑可能變質(zhì),。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,,一般顯色時間為10~15min即可。若顏色較淺,,可延長反應時間到20min,,反之則減短反應時間。
⑥ 未提及樣本請致電本公司技術(shù)服務部,。
十一、貯藏條件及保存期
貯藏條件: 2~8℃
保 質(zhì) 期: 12個月